Pereiti prie turinio
SVI
Audinys
Inkstai

Dokumentai

SVI

Cell line · Prekės numeris 400495

SVI ląstelių linija buvo klonuota iš glomerulų ataugų, izoliuotų iš H-2kb-tsA58 transgeninių pelių. Šios pelės turi temperatūrai jautrų...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas
SVI ląstelių linija buvo klonuota iš glomerulų, išskirtų iš H-2kb-tsA58 transgeninių pelių, ataugų. Šios pelės turi temperatūrai jautrų SV40 didžiojo T antigeno variantą, kontroliuojamą IFN-g indukuojamo H-2kb promotoriaus. Ląstelės dauginasi 33 laipsnių Celsijaus temperatūroje, o diferencijuojasi 37 laipsnių Celsijaus temperatūroje. Šiuo metu ląstelės sėkmingai kultivuojamos daugiau kaip 40 kartų, nepastebint fenotipo pokyčių. SVI yra labai panašios į E11 pagal morfologiją ir kelių žymenų raišką. Pavyzdžiui, podocino ir WT1 raiška yra mažesnė, palyginti su E11. Diferenciacija: Diferenciacijos procesą pradėkite įdėdami nekonfliktišką (-as) kolbą (-as) į inkubatorių 38 laipsnių Celsijaus temperatūroje / 5 % CO2 mažiausiai 14 dienų, kad diferenciacija būtų baigta. Interferono gama (INF-gama) pridėti nebūtina.
Audinys
Inkstai

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine podocyte cell line (SVI) contains a conditionally active SV40 Large T-Antigen transgene as part of the ImmortoMouse model, supporting temperature-sensitive immortalization. The construct is stably present in podocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Ląstelių tipas
Podocitai

04Identifikatoriai

Nuoroda
SVI (Cytion katalogo numeris 400495)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_5943

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
WT1, Lmx1b, nefrinas, NEPHI, FAT, P-kadherinas, CD2AP, ZO-I, podokaliksinas, podoplaninas, sinpo, podocinas, TRPC6 ir GAPDH.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

33 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
T75 ląstelių kultūros kolbose įskiepykite 1x 104 ląsteles/cm2 (apie 60 000 ląstelių/ml, 12 ml terpės vienoje T75) proliferacijos procesui. Laikykite ląsteles 33 °C temperatūroje / 5 % CO2, kol kolba bus užpildyta apie 75 %.
Skysčių atnaujinimas
3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Immort
Donoro amžius
Suaugusiųjų