SVI
Cell line · Číslo výrobku 400495
Buněčná linie SVI byla klonována z výrůstků glomerulů, které byly izolovány z transgenních myší H-2kb-tsA58. Tyto myši jsou nositeli teplotně citlivého...
Přizpůsobení / Doporučení
- SVICell line€800.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
- Buněčná linie SVI byla naklonována z výrůstků glomerulů, které byly izolovány z transgenních myší H-2kb-tsA58. Tyto myši nesou teplotně citlivou variantu velkého T antigenu SV40 pod kontrolou promotoru H-2kb indukovaného IFN-g. Buňky se množí při teplotě 33 °C a diferencují se při teplotě 37 °C. V současné době byly buňky úspěšně kultivovány po více než 40 pasáží, aniž by byly zaznamenány fenotypové změny. SVI jsou velmi podobné E11, pokud jde o morfologii a expresi několika markerů. Například podocin a WT1 jsou ve srovnání s E11 exprimovány v menší míře. Diferenciace: Diferenciační proces zahájíte umístěním nekonfluentní baňky (baněk) do inkubátoru při teplotě 38 °C / 5 % CO2 na dobu minimálně 14 dní, aby byla diferenciace dokončena. Přidání interferonu gama (INF-gamma) není nutné.
- Tkáň
- Ledviny
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Sex
- Nespecifikováno
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO-S1: This murine podocyte cell line (SVI) contains a conditionally active SV40 Large T-Antigen transgene as part of the ImmortoMouse model, supporting temperature-sensitive immortalization. The construct is stably present in podocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Typ buňky
- Podocyty
04Identifikátory
- Citace
- SVI (katalogové číslo Cytion 400495)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5943
05Exprese a náchylnost
- Exprese proteinů
- WT1, Lmx1b, nefrin, NEPHI, FAT, P-kadherin, CD2AP, ZO-I, podokalyxin, podoplanin, synpo, podocin, TRPC6 a GAPDH.
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubační atmosféra
33 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- Naočkujte kultivační lahve T75 1x 104 buňkami/cm2 (přibližně 60 000 buněk/ml, 12 ml média v jedné lahvi T75) pro proces proliferace. Udržujte buňky při teplotě 33 °C / 5 % CO2, dokud není lahev asi z 75 % konfluentní.
- Obnova tekutin
- 3krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Plemeno / poddruh
- (CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Immort
- Věk dárce
- Dospělí
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Prohlášení o vyloučení odpovědnosti
- Naše buňky jsou poskytovány výhradně pro účely laboratorního výzkumu in vitro a nejsou určeny pro klinické nebo diagnostické použití, ani nejsou určeny k podávání lidem nebo použití pro veterinární účely. Uživatelé musí dodržovat všechny platné pokyny a předpisy pro zacházení s těmito buňkami a jejich použití ve výzkumném prostředí.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Platí smlouvy s třetími stranami
- Ano
.jpg)