Перейти до вмісту
SVI
Тканина
Нирка

Документи

SVI

Cell line · Номер товару 400495

Клітинну лінію SVI було клоновано з відростків клубочків, виділених із трансгенних мишей H-2kb-tsA58. Ці миші є носіями температурно-чутливого...

€800.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис
Клітинну лінію SVI було клоновано з відростків клубочків, виділених з трансгенних мишей H-2kb-tsA58. Миші несуть термочутливий варіант великого Т-антигену SV40 під контролем ІФН-g-індукованого промотора H-2kb. Клітини проліферують при 33 градусах Цельсія, а диференціюються при 37 градусах Цельсія. На даний час клітини успішно культивуються вже більше 40 пасажів без будь-яких фенотипових змін. SVI дуже схожі на Е11 з точки зору морфології та експресії декількох маркерів. Наприклад, подоцин і WT1 експресуються меншою мірою порівняно з Е11. Диференціація: Почніть процес диференціації, помістивши неконфлюентні колби в інкубатор при 38 градусах Цельсія / 5% CO2 мінімум на 14 днів для завершення диференціації. Додавання інтерферону-гамма (INF-гамма) не є необхідним.
Тканина
Нирка

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This murine podocyte cell line (SVI) contains a conditionally active SV40 Large T-Antigen transgene as part of the ImmortoMouse model, supporting temperature-sensitive immortalization. The construct is stably present in podocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Тип клітини
Подоцит

04Ідентифікатори

Посилання
SVI (номер за каталогом Cytion 400495)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_5943

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
WT1, Lmx1b, нефрін, NEPHI, FAT, P-кадгерин, CD2AP, ZO-I, подокаліксин, подопланін, synpo, подоцин, TRPC6 і GAPDH.

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

33°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Для процесу проліферації засейте колби для культивування клітин T75 1x 104 клітинами/см2 (приблизно 60 000 клітин/мл, 12 мл середовища в одній колбі T75). Зберігайте клітини при температурі 33 °C / 5 % CO2, доки колба не буде заповнена приблизно на 75 %.
Оновлення рідини
3 рази на тиждень
Розморожування та культивування

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Immort
Вік донора
Дорослий