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Cell line · 제품 번호 400495

SVI 세포주는 H-2kb-tsA58 형질전환 마우스에서 분리된 사구체의 증식물로부터 클로닝되었다. 이 마우스는 온도에 민감한...

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사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
롯
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1

01일반 정보

설명
SVI 세포주는 H-2kb-tsA58 형질전환 마우스에서 분리한 사구체에서 유래한 사구체에서 복제되었습니다. 이 마우스는 IFN-g 유도성 H-2kb 프로모터의 제어하에 온도에 민감한 SV40 대형 T 항원의 변이체를 가지고 있습니다. 세포는 섭씨 33도에서 증식하고 섭씨 37도에서 분화합니다. 현재 이 세포는 표현형 변화 없이 40회 이상 성공적으로 배양되었습니다. SVI는 형태와 여러 마커의 발현 측면에서 E11과 매우 유사합니다. 예를 들어, 포도신과 WT1은 E11에 비해 덜 발현됩니다. 분화: 분화가 완료될 때까지 최소 14일 동안 38℃/5% CO2의 인큐베이터에 비수용성 플라스크를 넣어 분화 과정을 시작합니다. 인터페론-감마(INF-감마)를 추가할 필요는 없습니다.
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신장

02분류

생물체
마우스
성
미지정
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This murine podocyte cell line (SVI) contains a conditionally active SV40 Large T-Antigen transgene as part of the ImmortoMouse model, supporting temperature-sensitive immortalization. The construct is stably present in podocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

세포 유형
포도상구균

04식별자

인용
SVI(사이티온 카탈로그 번호 400495)
NCBI 세금 식별번호
10090
셀로사우루스
CVCL_5943

05발현 및 감수성

단백질 발현
WT1, Lmx1b, 네프린, 네피, FAT, P-카데린, CD2AP, ZO-I, 포도칼릭신, 포도플라닌, 신포, 포도신, TRPC6 및 GAPDH.

06취급 및 배양

배지
RPMI 1640, w: 2.0mM 안정 글루타민, w: 2.0g/L NaHCO3(사이티온 제품 번호 820700a)
배양 조건

33°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
증식 과정을 위해 T75 세포 배양 플라스크에 1x 10⁴ 세포/cm² (약 60,000 세포/ml, T75 플라스크당 배지 12ml)를 접종합니다. 플라스크가 약 75% 접합될 때까지 세포를 섭씨 33도 / 이산화탄소 5% 조건에서 유지합니다.
유체 교체
주 3회
해동 및 배양

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Immort
기증자 연령
성인