.jpg)
SVI
Cell line · Product number 400495
The SVI cell line has been cloned from the outgrowth of glomeruli which were isolated from H-2kb-tsA58 transgenic mice. The mice carry a temperature-sensitiv...
Customization / Recommendations
- SVICell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- Dòng tế bào SVI đã được nhân bản từ sự phát triển của các tiểu cầu thận được tách ra từ chuột biến đổi gen H-2kb-tsA58. Chuột mang biến thể nhạy cảm với nhiệt độ của kháng nguyên T lớn SV40, được điều khiển bởi promoter H-2kb được kích hoạt bởi IFN-g. Tế bào phát triển ở 33 độ Celsius và biệt hóa ở 37 độ Celsius. Hiện tại, các tế bào đã được nuôi cấy thành công hơn 40 lần mà không ghi nhận sự thay đổi về hình thái. SVI rất tương tự với E11 về mặt hình thái và biểu hiện của một số dấu hiệu. Ví dụ, podocin và WT1 được biểu hiện ở mức độ thấp hơn so với E11. Phân hóa: Bắt đầu quá trình phân hóa bằng cách đặt các bình nuôi cấy chưa đạt mật độ tế bào tối đa vào tủ ấm ở 38°C / 5% CO₂ trong ít nhất 14 ngày để hoàn thành quá trình phân hóa. Việc bổ sung interferon-gamma (INF-gamma) không cần thiết.
- Tissue
- Thận
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine podocyte cell line (SVI) contains a conditionally active SV40 Large T-Antigen transgene as part of the ImmortoMouse model, supporting temperature-sensitive immortalization. The construct is stably present in podocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- Tế bào podocyte
04Identifiers
- Citation
- SVI (Số catalog Cytion 400495)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5943
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- WT1, Lmx1b, nephrin, NEPHI, FAT, P-cadherin, CD2AP, ZO-I, podocalyxin, podoplanin, synpo, podocin, TRPC6 và GAPDH.
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
33°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Seeding density
- Tiêm nhiễm các bình nuôi cấy tế bào T75 với mật độ 1 × 10⁴ tế bào/cm² (khoảng 60.000 tế bào/ml, 12 ml môi trường trong một bình T75) cho quá trình nhân lên. Duy trì tế bào ở nhiệt độ 33°C / 5% CO₂, cho đến khi bình nuôi cấy đạt khoảng 75% mật độ phủ kín.
- Fluid renewal
- 3 lần mỗi tuần
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
08Donor
- Breed / subspecies
- (CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Bất tử
- Donor age
- Người lớn
09Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Disclaimer
- Các tế bào của chúng tôi được cung cấp độc quyền cho mục đích nghiên cứu trong phòng thí nghiệm in vitro và không được sử dụng cho mục đích lâm sàng hoặc chẩn đoán, cũng như không được tiêm cho con người hoặc sử dụng cho mục đích thú y. Người sử dụng phải tuân thủ tất cả các hướng dẫn và quy định áp dụng liên quan đến việc xử lý và sử dụng các tế bào này trong môi trường nghiên cứu.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Third-party agreements apply
- Yes