imWilms1

Wilms1 ląstelių linija iš pradžių buvo gauta iš pirminio Vilmso naviko, gauto iš paciento, kuriam buvo diagnozuoti dideli abipusiai inkstų navikai, būdingi Vilmso navikui (nefroblastomai). Ši ląstelių linija turi homozigotinę WT1 geno beprasmę mutaciją (c.149 C>A, p.S50X), dėl kurios susidaro sutrumpintas, nefunkcionalus WT1 baltymas. WT1 yra labai svarbus genas inkstų vystymuisi, o jo mutacija yra glaudžiai susijusi su Vilmso naviko patogeneze, ypač stromos diferenciacija pasižyminčiuose navikuose. Wilms1 ląstelės pasižymi stabiliu kariotipu be reikšmingų chromosomų anomalijų, joms būdingas mezenchiminis fenotipas, jose ekspresuojamas vimentinas, tačiau nėra epitelio žymenų, pavyzdžiui, citokeratino. Ši linija pasižymi ribotu, bet reikšmingu mezenchiminės diferenciacijos gebėjimu, įskaitant galimybę tam tikromis sąlygomis diferencijuotis į raumenines ląsteles, todėl ji yra labai svarbus modelis WT1 mutacijų molekulinėms pasekmėms tirti.

Siekiant įveikti ribotą pirminių Wilms1 ląstelių gyvavimo trukmę, buvo sukurta imWilms1 ląstelių linija, į pirmines naviko ląsteles įterpiant trigubą mutavusį SV40 didelį T antigeną (U19dl89-97tsA58) ir taip palengvinant jų imortalizaciją. Ši modifikacija leidžia imWilms1 ląstelėms daugintis neribotą laiką, išlaikant chromosomų stabilumą, todėl tai yra patikimas ilgalaikių tyrimų modelis. Imortalizuotos imWilms1 ląstelės ir toliau pasižymi ta pačia WT1 mutacija ir išlaiko mezenchimines pirminės Wilms1 linijos savybes.

Be genetinių ir fenotipinių savybių, imWilms1 ląstelių linija buvo išsamiai ištirta dėl jos signalinio kelio aktyvumo. Proteominiai tyrimai atskleidė kelių receptorių tirozino kinazių (RTK), įskaitant EGFR, PDGFRβ ir AXL, fosforilinimą ir aktyvinimą, kartu su tolesniu MAPK signalinių kelių aktyvinimu. Nuolatinis šių kelių aktyvavimas imWilms1 ląstelėse pabrėžia jų svarbą tiriant tikslines Vilmso naviko gydymo strategijas. Apskritai imWilms1 yra patikimas ir ilgalaikis modelis, kuriuo galima tirti molekulinius mechanizmus, lemiančius Vilmso naviko vystymąsi ir progresavimą, ypač tuos, kuriuos lemia WT1 mutacijos ir pakitę signaliniai keliai.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime