imWilms1

Wilms1細胞株はもともと、Wilms腫瘍（腎芽腫）の特徴的な病態である両側性の大きな腎腫瘍と診断された患者から得られた原発性Wilms腫瘍に由来する。この細胞株は、WT1遺伝子にホモ接合性のナンセンス変異（c.149 C>A, p.S50X）を有し、切断された非機能性WT1タンパク質の産生をもたらす。WT1は腎臓の発生において重要な遺伝子であり、その変異はウィルムス腫瘍、特に間質分化を示す腫瘍の病態と密接に関連している。Wilms1細胞は、顕著な染色体異常のない安定した核型を示し、サイトケラチンのような上皮性マーカーを欠く一方でビメンチンを発現する間葉系表現型を特徴とする。この細胞株は、特定の条件下で筋肉様細胞に分化する可能性を含め、限定的ではあるが有意な間葉系分化能を示し、WT1変異の分子的影響を研究する上で重要なモデルとなっている。

初代Wilms1細胞の寿命の制限を克服するために、三重変異SV40ラージT抗原（U19dl89-97tsA58）をオリジナルの腫瘍細胞に導入して不死化を促進し、imWilms1細胞株を樹立した。この改変により、imWilms1細胞は染色体の安定性を維持したまま無期限に増殖することが可能となり、長期的研究のための信頼できるモデルとなった。不死化されたimWilms1細胞は、引き続き同じWT1変異を示し、親Wilms1株の間葉系の特徴を保持している。

遺伝的および表現型の特徴に加えて、imWilms1細胞株はそのシグナル伝達経路活性について広範に解析されている。プロテオミクス研究により、EGFR、PDGFRβ、AXLを含むいくつかの受容体チロシンキナーゼ（RTK）のリン酸化と活性化が明らかにされ、下流ではMAPKシグナル伝達経路が活性化された。imWilms1細胞におけるこれらの経路の一貫した活性化は、ウィルムス腫瘍の標的治療戦略を探求するための関連性を強調している。全体として、imWilms1は、ウィルムス腫瘍の発生と進行の根底にある分子メカニズム、特にWT1突然変異と異常なシグナル伝達経路によって駆動される分子メカニズムを研究するための強固で長期的なモデルとして役立つ。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。