Pereiti prie turinio
Lovo-Luc
Audinys
Metastazių
Liga
Storosios žarnos adenokarcinoma
Metastazių vieta
Kairysis viršraktikaulinis limfmazgis

Dokumentai

Lovo-Luc

Cell line · Prekės numeris 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

„LoVo-Luc“ yra bioliuminescencinis žmogaus kolorektalinės adenokarcinomos ląstelių linijos „LoVo“ darinys, genetiškai modifikuotas taip, kad stabiliai ekspresuotų ugnies skruzdės liuciferazės reporterinį geną. Pirminė LoVo ląstelių linija buvo išskirta iš 56 metų vyro, sergančio kolorektaliniu adenokarcinomu, metastazavusio kairiojo supraklavikulinio limfmazgio ir yra viena iš plačiausiai vėžio tyrimuose naudojamų kolorektalinio vėžio ląstelių linijų. „LoVo“ ląstelės pasižymi epitelio tipo morfologija ir joms būdingas mikrosatelitų nestabilumas (MSI), nepakankamas nesutapimų taisymas (dMMR) bei onkogenų, įskaitant „Myc“, „myb“, „ras“, „fos“ ir „p53“, ekspresija. Dėl šių savybių „LoVo“ yra tinkamas modelis, skirtas tirti nesutapimų taisymo trūkumo turinčio kolorektalinio vėžio biologiją ir terapinį atsaką, įskaitant jautrumą imunoterapijai.

Stabili liuciferazės integracija „LoVo-Luc“ ląstelėse leidžia atlikti jautrų, kiekybinį bioluminescencinį vaizdavimą (BLI) naviko apkrovos nustatymui ksenotransplantacijos modeliuose, naudojant imunokompromituotus šeimininkus. Luminescencinis signalas koreliuoja su gyvybingų naviko ląstelių skaičiumi, o tai sudaro sąlygas neinvaziniam naviko įsitvirtinimo, augimo kinetikos ir atsako į gydymą stebėjimui laikui bėgant. „LoVo-Luc“ yra ypač vertingas atliekant ikiklinikinius tyrimus, kuriuose vertinami imuninių kontrolės taškų inhibitoriai, chemoterapiniai vaistai ir tikslinės terapijos MMR deficito turinčio storosios žarnos vėžio kontekste, taip pat atliekant didelio našumo vaistų atranką ir storosios žarnos vėžio biologijos mechanizmų tyrimus.

„LoVo-Luc“ išlaiko įprastas tėvinės „LoVo“ linijos molekulinės savybes, įskaitant MSI fenotipą, onkogenų ekspresijos profilį ir karcinoembrioninio antigeno (CEA) gamybą. Liuciferazės reporteris žymiai padidina eksperimentų našumą ir leidžia realiuoju laiku farmakodinamiškai įvertinti gydymo veiksmingumą. Prieš naudojant šią liniją didelio masto ikiklinikiniuose tyrimuose, mokslininkai turėtų patikrinti liuciferazės aktyvumą, MMR būklę ir augimo kinetiką savo konkrečiomis eksperimentinėmis sąlygomis.

Audinys
Metastazių
Liga
Storosios žarnos adenokarcinoma
Metastazių vieta
Kairysis viršraktikaulinis limfmazgis

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
24–48 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
„Lovo-Luc“ (Cytion katalogo numeris 305682)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, B kraujo grupė, Luc2 (vabalas, kodonų optimizacija)
Izofermentai
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogenai
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutacijų profilis
Mutacija: p.Lys437Argfs*5, heterozigotinė; Mutacija: p.Arg1114Ter, heterozigotinė; Mutacija: p.Met1431fs*42, heterozigotinė; Mutacija: p.Arg2816Gln, heterozigotinė; Mutacija: p.Leu15Phefs*41, heterozigotinė; Mutacija: p.Arg505Cys, heterozigotinė; Mutacija: p.Gly13Asp, heterozigotinė; Mutacija: p.Ala292Val, heterozigotinė; Mutacija: p.Lys128Serfs*35, homozigotinė
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
Karcinoembrioninis antigenas (CEA) 908 ng/106 ląstelių/10 dienų

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12K terpė, w: 2,0 mM L-Glutaminas, w: 2,0 mM natrio piruvatas, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820608a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
1–3 × 10⁴/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
56 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių