Pāriet uz saturu
Lovo-Luc
Audums
Metastātisks
Slimība
Resnās zarnas adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Kreisais virsklaiviskais limfmezgls

Dokumenti

Lovo-Luc

Cell line · Preces numurs 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

LoVo-Luc ir cilvēka LoVo kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnijas bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā LoVo šūnu līnija tika izveidota no 56 gadus veca vīrieša pacienta kolorektālās adenokarcinomas metastātiskā kreisā supraklavikulārā limfmezgla un ir viena no visplašāk izmantotajām kolorektālā vēža šūnu līnijām vēža pētniecībā. LoVo šūnas uzrāda epitēlija tipa morfoloģiju, un tām raksturīga mikrosatelītu nestabilitāte (MSI), nepilnīga nesakritības reparācija (dMMR) un onkogēnu, tostarp Myc, myb, ras, fos un p53, ekspresija. Šīs īpašības padara LoVo par atbilstošu modeli, lai pētītu kolorektālā vēža bioloģiju ar defektīvu nesakritības reparāciju un terapeitisko reakciju, tostarp jutību pret imūnterapiju.

Stabila luciferāzes integrācija LoVo-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, kvantitatīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI) audzēja apjomam ksenotransplantātu modeļos, izmantojot imūnsistēmas novājinātus saņēmējus. Luminiscences signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, nodrošinot neinvazīvu audzēja ieaugšanas, augšanas kinētikas un ārstēšanas reakcijas garenvirziena novērošanu. LoVo-Luc ir īpaši vērtīgs pirmsklīniskajos pētījumos, kuros novērtē imūnkontrolpunktu inhibitorus, ķīmijterapijas līdzekļus un mērķtiecīgas terapijas saistībā ar MMR deficītu kolorektālajā vēzī, kā arī augstas caurlaidspējas zāļu skrīningam un kolorektālā vēža bioloģijas mehānismu izpētei.

LoVo-Luc saglabā vecāko LoVo līnijas iedibinātās molekulārās īpašības, tostarp tās MSI fenotipu, onkogēnu ekspresijas profilu un karcinoembrionālā antigēna (CEA) ražošanu. Luciferāzes reportera klātbūtne ievērojami palielina eksperimentālo caurlaidspēju un ļauj reāllaikā veikt farmakodinamisko ārstēšanas efektivitātes novērtējumu. Pirms izmantošanas plaša mēroga pirmsklīniskajos pētījumos pētniekiem ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, MMR statuss un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Metastātisks
Slimība
Resnās zarnas adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Kreisais virsklaiviskais limfmezgls

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24–48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Lovo-Luc (Cytion kataloga numurs 305682)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, asinsgrupa B, Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogēni
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutāciju profils
Mutācija: p.Lys437Argfs*5, heterozigota; Mutācija: p.Arg1114Ter, heterozigota; Mutācija: p.Met1431fs*42, heterozigota; Mutācija: p.Arg2816Gln, heterozigota; Mutācija: p.Leu15Phefs*41, heterozigota; Mutācija: p.Arg505Cys, heterozigota; Mutācija: p.Gly13Asp, heterozigota; Mutācija: p.Ala292Val, heterozigota; Mutācija: p.Lys128Serfs*35, homozigota
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Karcinoembrionālais antigēns (CEA) 908 ng/106 šūnas/10 dienas

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12K barotne, w: 2,0 mM L-glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820608a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
56 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis