
- Tissue
- Metastático
- Disease
- Adenocarcinoma do cólon
- Metastatic site
- Linfonodo supraclavicular esquerdo
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Lovo-Luc
Cell line · Product number 305682
LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...
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01General information
- Description
A LoVo-Luc é um derivado bioluminescente da linhagem celular humana LoVo de adenocarcinoma colorretal, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de vaga-lume. A linhagem celular parental LoVo foi estabelecida a partir de um linfonodo supraclavicular esquerdo metastático de um adenocarcinoma colorretal em um paciente do sexo masculino de 56 anos e é uma das linhagens celulares de câncer colorretal mais amplamente utilizadas na pesquisa oncológica. As células LoVo apresentam morfologia de tipo epitelial e são caracterizadas por instabilidade de microssatélites (MSI), reparo de incompatibilidade deficiente (dMMR) e expressão de oncogenes, incluindo Myc, myb, ras, fos e p53. Essas características tornam a LoVo um modelo relevante para o estudo da biologia do câncer colorretal com deficiência de reparo de incompatibilidade e das respostas terapêuticas, incluindo a sensibilidade à imunoterapia.
A integração estável da luciferase na LoVo-Luc permite a imagem por bioluminescência (BLI) sensível e quantitativa da carga tumoral em modelos de xenoenxertos utilizando hospedeiros imunocomprometidos. O sinal luminescente se correlaciona com o número de células tumorais viáveis, possibilitando o monitoramento longitudinal não invasivo do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta ao tratamento. O LoVo-Luc é particularmente valioso para estudos pré-clínicos que avaliam inibidores de pontos de controle imunológico, agentes quimioterápicos e terapias direcionadas no contexto do câncer colorretal com deficiência de MMR, bem como para triagem de medicamentos em alta produtividade e investigações mecanicistas da biologia do câncer colorretal.
O LoVo-Luc mantém as características moleculares estabelecidas da linhagem parental LoVo, incluindo seu fenótipo MSI, perfil de expressão de oncogenes e produção do antígeno carcinoembrionário (CEA). O repórter de luciferase aumenta substancialmente a produtividade experimental e permite a avaliação farmacodinâmica em tempo real da eficácia do tratamento. Os pesquisadores devem verificar a atividade da luciferase, o status do MMR e a cinética de crescimento sob suas condições experimentais específicas antes de utilizá-la em estudos pré-clínicos em larga escala.
- Tissue
- Metastático
- Disease
- Adenocarcinoma do cólon
- Metastatic site
- Linfonodo supraclavicular esquerdo
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Sim, em camundongos nude
- Doubling time
- 24 a 48 horas
04Identifiers
- Citation
- Lovo-Luc (número de catálogo da Cytion 305682)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y03
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, tipo sanguíneo B, Luc2 (vaga-lume, com códons otimizados)
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
- Oncogenes
- Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Mutational profile
- Mutação: p.Lys437Argfs*5, heterozigótica; Mutação: p.Arg1114Ter, heterozigótica; Mutação: p.Met1431fs*42, heterozigótica; Mutação: p.Arg2816Gln, heterozigótica; Mutação: p.Leu15Phefs*41, heterozigótica; Mutação: p.Arg505Cys, heterozigótica; Mutação: p.Gly13Asp, heterozigótica; Mutação: p.Ala292Val, heterozigótica; Mutação: p.Lys128Serfs*35, homozigótica
- Reverse transcriptase
- Negativo
- Products
- Antígeno carcinoembrionário (CEA) 908 ng/106 células/10 dias
06Handling and culture
- Culture medium
- Médio F12K de Ham, contendo: 2,0 mM de L-glutamina, 2,0 mM de piruvato de sódio e 2,5 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820608a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Split ratio
- 1 a 3
- Seeding density
- 1-3*10⁴/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 56 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes