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Lovo-Luc
Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma do cólon
Local da metástase
Linfonodo supraclavicular esquerdo

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Lovo-Luc

Cell line · Número do produto 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

A LoVo-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana LoVo de adenocarcinoma colorretal, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental LoVo foi estabelecida a partir de um linfonodo supraclavicular esquerdo metastático de um adenocarcinoma colorretal num doente do sexo masculino de 56 anos e é uma das linhas celulares de cancro colorretal mais utilizadas na investigação oncológica. As células LoVo apresentam uma morfologia de tipo epitelial e caracterizam-se pela instabilidade de microssatélites (MSI), reparação de desajustes deficiente (dMMR) e expressão de oncogenes, incluindo Myc, myb, ras, fos e p53. Estas características tornam a LoVo um modelo relevante para o estudo da biologia do cancro colorretal com deficiência na reparação de desajustes e das respostas terapêuticas, incluindo a sensibilidade à imunoterapia.

A integração estável da luciferase na LoVo-Luc permite a obtenção de imagens por bioluminescência (BLI) sensíveis e quantitativas da carga tumoral em modelos de xenoenxertos utilizando hospedeiros imunocomprometidos. O sinal luminescente está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal não invasiva do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta ao tratamento. O LoVo-Luc é particularmente valioso para estudos pré-clínicos que avaliam inibidores de pontos de controlo imunitários, agentes quimioterapêuticos e terapias direcionadas no contexto do cancro colorretal com deficiência de MMR, bem como para o rastreio de fármacos de alto rendimento e investigações mecanistas da biologia do cancro colorretal.

O LoVo-Luc mantém as características moleculares estabelecidas da linha parental LoVo, incluindo o seu fenótipo MSI, o perfil de expressão de oncogenes e a produção do antígeno carcinoembrionário (CEA). O repórter de luciferase aumenta substancialmente o rendimento experimental e permite a avaliação farmacodinâmica em tempo real da eficácia do tratamento. Os investigadores devem verificar a atividade da luciferase, o estado do MMR e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização em estudos pré-clínicos em grande escala.

Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma do cólon
Local da metástase
Linfonodo supraclavicular esquerdo

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus
Tempo de duplicação
24 a 48 horas

04Identificadores

Referência
Lovo-Luc (número de catálogo da Cytion 305682)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, grupo sanguíneo B, Luc2 (pirilampo, com códons otimizados)
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Oncogenes
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Perfil mutacional
Mutação: p.Lys437Argfs*5, heterozigótica; Mutação: p.Arg1114Ter, heterozigótica; Mutação: p.Met1431fs*42, heterozigótica; Mutação: p.Arg2816Gln, heterozigótica; Mutação: p.Leu15Phefs*41, heterozigótica; Mutação: p.Arg505Cys, heterozigótica; Mutação: p.Gly13Asp, heterozigótica; Mutação: p.Ala292Val, heterozigótica; Mutação: p.Lys128Serfs*35, homozigótica
Transcriptase reversa
Negativo
Produtos
Antigénio carcinoembrionário (CEA) 908 ng/106 células/10 dias

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12K Medium, com: 2,0 mM L-Glutamina, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,5 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820608a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1-3*10⁴/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
56 anos
Etnia
Caucasiano