
- Tecido
- Metastático
- Doença
- Adenocarcinoma do cólon
- Local da metástase
- Linfonodo supraclavicular esquerdo
Documentos
Lovo-Luc
Cell line · Número do produto 305682
LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...
Personalização / Recomendações
- Lovo-LucCell line€777.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A LoVo-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana LoVo de adenocarcinoma colorretal, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental LoVo foi estabelecida a partir de um linfonodo supraclavicular esquerdo metastático de um adenocarcinoma colorretal num doente do sexo masculino de 56 anos e é uma das linhas celulares de cancro colorretal mais utilizadas na investigação oncológica. As células LoVo apresentam uma morfologia de tipo epitelial e caracterizam-se pela instabilidade de microssatélites (MSI), reparação de desajustes deficiente (dMMR) e expressão de oncogenes, incluindo Myc, myb, ras, fos e p53. Estas características tornam a LoVo um modelo relevante para o estudo da biologia do cancro colorretal com deficiência na reparação de desajustes e das respostas terapêuticas, incluindo a sensibilidade à imunoterapia.
A integração estável da luciferase na LoVo-Luc permite a obtenção de imagens por bioluminescência (BLI) sensíveis e quantitativas da carga tumoral em modelos de xenoenxertos utilizando hospedeiros imunocomprometidos. O sinal luminescente está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal não invasiva do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta ao tratamento. O LoVo-Luc é particularmente valioso para estudos pré-clínicos que avaliam inibidores de pontos de controlo imunitários, agentes quimioterapêuticos e terapias direcionadas no contexto do cancro colorretal com deficiência de MMR, bem como para o rastreio de fármacos de alto rendimento e investigações mecanistas da biologia do cancro colorretal.
O LoVo-Luc mantém as características moleculares estabelecidas da linha parental LoVo, incluindo o seu fenótipo MSI, o perfil de expressão de oncogenes e a produção do antígeno carcinoembrionário (CEA). O repórter de luciferase aumenta substancialmente o rendimento experimental e permite a avaliação farmacodinâmica em tempo real da eficácia do tratamento. Os investigadores devem verificar a atividade da luciferase, o estado do MMR e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização em estudos pré-clínicos em grande escala.
- Tecido
- Metastático
- Doença
- Adenocarcinoma do cólon
- Local da metástase
- Linfonodo supraclavicular esquerdo
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sim, em ratinhos nus
- Tempo de duplicação
- 24 a 48 horas
04Identificadores
- Referência
- Lovo-Luc (número de catálogo da Cytion 305682)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y03
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão do antígeno
- HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, grupo sanguíneo B, Luc2 (pirilampo, com códons otimizados)
- Isoenzimas
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
- Oncogenes
- Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Perfil mutacional
- Mutação: p.Lys437Argfs*5, heterozigótica; Mutação: p.Arg1114Ter, heterozigótica; Mutação: p.Met1431fs*42, heterozigótica; Mutação: p.Arg2816Gln, heterozigótica; Mutação: p.Leu15Phefs*41, heterozigótica; Mutação: p.Arg505Cys, heterozigótica; Mutação: p.Gly13Asp, heterozigótica; Mutação: p.Ala292Val, heterozigótica; Mutação: p.Lys128Serfs*35, homozigótica
- Transcriptase reversa
- Negativo
- Produtos
- Antigénio carcinoembrionário (CEA) 908 ng/106 células/10 dias
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- Ham's F12K Medium, com: 2,0 mM L-Glutamina, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,5 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820608a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Rácio de divisão
- 1 a 3
- Densidade de sementeira
- 1-3*10⁴/cm²
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 56 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim