Siirry sisältöön
Lovo-Luc
Kudos
Metastaattinen
Sairaus
Paksusuolen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Vasen supraklavikulaarinen imusolmuke

Asiakirjat

Lovo-Luc

Cell line · Tuotenumero 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

LoVo-Luc on ihmisen LoVo-kolorektaalisen adenokarsinooman solulinjan bioluminesoiva johdannainen, joka on muokattu ilmentämään vakaasti tulikärpäsen lusiferaasi-raportointigeeniä. Alkuperäinen LoVo-solulinja perustettiin 56-vuotiaan miespotilaan kolorektaalisen adenokarsinooman metastaattisesta vasemmasta supraklavikulaarisesta imusolmukkeesta, ja se on yksi syöpätutkimuksessa yleisimmin käytetyistä kolorektaalisyöpäsolulinjoista. LoVo-soluilla on epiteelin kaltainen morfologia, ja niille on ominaista mikrosatelliittien epävakaus (MSI), puutteellinen mismatch-korjaus (dMMR) sekä onkogeenien, kuten Myc:n, myb:n, ras:n, fos:n ja p53:n, ilmentyminen. Nämä ominaisuudet tekevät LoVo-solulinjasta merkittävän mallin, jolla voidaan tutkia mismatch-korjauspuutteisen kolorektaalisyövän biologiaa ja hoitovasteita, mukaan lukien herkkyys immunoterapialle.

LoVo-Luc-solulinjan vakaa lusiferaasi-integraatio mahdollistaa herkän ja kvantitatiivisen bioluminesenssikuvantamisen (BLI) kasvaimen kuormituksen mittaamiseksi ksenotransplantaattimalleissa, joissa käytetään immuunipuutteisia isäntäeläimiä. Luminesenssisignaali korreloi elävien kasvainsolujen lukumäärän kanssa, mikä tukee kasvaimen kiinnittymisen, kasvukineettisten ominaisuuksien ja hoitovasteen ei-invasiivista pitkittäistutkimusta. LoVo-Luc on erityisen arvokas prekliinisissä tutkimuksissa, joissa arvioidaan immuunivalvontapisteiden estäjiä, kemoterapeuttisia aineita ja kohdennettuja hoitoja MMR-puutteellisen kolorektaalisyövän yhteydessä, sekä suurikapasiteettisessa lääkeaineiden seulonnassa ja kolorektaalisyövän biologian mekanistisissa tutkimuksissa.

LoVo-Luc säilyttää emolinjan LoVo vakiintuneet molekyyliset ominaisuudet, mukaan lukien sen MSI-fenotyypin, onkogeenien ilmentymisprofiilin ja karsinoembryonaalisen antigeenin (CEA) tuotannon. Lusiferaasi-raportteri parantaa merkittävästi kokeiden läpimenokapasiteettia ja mahdollistaa hoidon tehokkuuden reaaliaikaisen farmakodynaamisen arvioinnin. Tutkijoiden tulee tarkistaa lusiferaasiaktiivisuus, MMR-tila ja kasvukineettiset ominaisuudet omissa kokeellisissa olosuhteissaan ennen tuotteen käyttöä laajamittaisissa prekliinisissä tutkimuksissa.

Kudos
Metastaattinen
Sairaus
Paksusuolen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Vasen supraklavikulaarinen imusolmuke

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä
Kaksinkertaistumisaika
24–48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Lovo-Luc (Cytion-tuotenumero 305682)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, veriryhmä B, Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)
Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogeenit
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutaatioprofiili
Mutaatio: p.Lys437Argfs*5, heterotsygootti; Mutaatio: p.Arg1114Ter, heterotsygootti; Mutaatio: p.Met1431fs*42, heterotsygootti; Mutaatio: p.Arg2816Gln, heterotsygootti; Mutaatio: p.Leu15Phefs*41, heterotsygootti; Mutaatio: p.Arg505Cys, heterotsygootti; Mutaatio: p.Gly13Asp, heterotsygootti; Mutaatio: p.Ala292Val, heterotsygootti; Mutaatio: p.Lys128Serfs*35, homotsygootti
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
Karsinoembryoninen antigeeni (CEA) 908 ng/106 solua/10 päivää

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiinia, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820608a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
56 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen