
- Tissue
- גרורתי
- Disease
- אדנוקרצינומה של המעי הגס
- Metastatic site
- בלוטת לימפה על-צלעית שמאלית
Documents
Lovo-Luc
Cell line · Product number 305682
LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
LoVo-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי LoVo, שמקורו באדנוקרצינומה של המעי הגס, אשר הונדס כך שיבטא באופן יציב את גן הרפורט של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי LoVo הוקם מבלוטת לימפה גרורתית מעל עצם הבריח השמאלית, שמקורה באדנוקרצינומה של המעי הגס, שנלקחה מחולה גבר בן 56, והוא אחד מקווי התאים של סרטן המעי הגס הנפוצים ביותר במחקר הסרטן. תאי LoVo מציגים מורפולוגיה דמוית אפיתל ומאופיינים בחוסר יציבות מיקרו-סאטליטית (MSI), תיקון אי-התאמה לקוי (dMMR) וביטוי של אונקוגנים, כולל Myc, myb, ras, fos ו-p53. תכונות אלו הופכות את LoVo למודל רלוונטי לחקר הביולוגיה של סרטן המעי הגס עם חוסר בתיקון אי-התאמות ולתגובות טיפוליות, לרבות רגישות לאימונוטרפיה.
השילוב היציב של לוקיפרז ב-LoVo-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלים זרים (xenograft) המשתמשים במאכסנים בעלי מערכת חיסון מוחלשת. האות הזוהר מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר ניטור ארוך טווח ולא פולשני של השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה ותגובת הטיפול. LoVo-Luc הוא בעל ערך רב במיוחד למחקרים פרה-קליניים המעידים על מעכבי נקודות בקרה חיסוניות, חומרים כימותרפיים וטיפולים ממוקדים בהקשר של סרטן המעי הגס עם חוסר ב-MMR, כמו גם לסינון תרופות בתפוקה גבוהה ולחקירות מכניסטיות של הביולוגיה של סרטן המעי הגס.
LoVo-Luc שומר על המאפיינים המולקולריים המוכרים של קו ה-LoVo ההורי, כולל הפנוטיפ של MSI, פרופיל הביטוי של אונקוגנים, וייצור האנטיגן הקרצינו-עוברי (CEA). הרפורט של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את תפוקת הניסוי ומאפשר הערכה פרמקודינמית בזמן אמת של יעילות הטיפול. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את מצב ה-MMR ואת קינטיקת הגידול בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם לפני השימוש במחקרים פרה-קליניים בקנה מידה גדול.
- Tissue
- גרורתי
- Disease
- אדנוקרצינומה של המעי הגס
- Metastatic site
- בלוטת לימפה על-צלעית שמאלית
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
- Doubling time
- 24–48 שעות
04Identifiers
- Citation
- Lovo-Luc (מספר קטלוג Cytion 305682)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y03
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, סוג דם B, Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
- Oncogenes
- Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Mutational profile
- מוטציה: p.Lys437Argfs*5, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg1114Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Met1431fs*42, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg2816Gln, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Leu15Phefs*41, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg505Cys, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Gly13Asp, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Ala292Val, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Lys128Serfs*35, הומוזיגוטית
- Reverse transcriptase
- שלילי
- Products
- אנטיגן קרצינואמבריוני (CEA) 908 נ"ג/106 תאים/10 ימים
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820608a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 1–3*10^4/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 56 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes