Skip to content
Lovo-Luc
Tissue
גרורתי
Disease
אדנוקרצינומה של המעי הגס
Metastatic site
בלוטת לימפה על-צלעית שמאלית

Documents

Lovo-Luc

Cell line · Product number 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

US$777.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

LoVo-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי LoVo, שמקורו באדנוקרצינומה של המעי הגס, אשר הונדס כך שיבטא באופן יציב את גן הרפורט של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי LoVo הוקם מבלוטת לימפה גרורתית מעל עצם הבריח השמאלית, שמקורה באדנוקרצינומה של המעי הגס, שנלקחה מחולה גבר בן 56, והוא אחד מקווי התאים של סרטן המעי הגס הנפוצים ביותר במחקר הסרטן. תאי LoVo מציגים מורפולוגיה דמוית אפיתל ומאופיינים בחוסר יציבות מיקרו-סאטליטית (MSI), תיקון אי-התאמה לקוי (dMMR) וביטוי של אונקוגנים, כולל Myc, myb, ras, fos ו-p53. תכונות אלו הופכות את LoVo למודל רלוונטי לחקר הביולוגיה של סרטן המעי הגס עם חוסר בתיקון אי-התאמות ולתגובות טיפוליות, לרבות רגישות לאימונוטרפיה.

השילוב היציב של לוקיפרז ב-LoVo-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלים זרים (xenograft) המשתמשים במאכסנים בעלי מערכת חיסון מוחלשת. האות הזוהר מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר ניטור ארוך טווח ולא פולשני של השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה ותגובת הטיפול. LoVo-Luc הוא בעל ערך רב במיוחד למחקרים פרה-קליניים המעידים על מעכבי נקודות בקרה חיסוניות, חומרים כימותרפיים וטיפולים ממוקדים בהקשר של סרטן המעי הגס עם חוסר ב-MMR, כמו גם לסינון תרופות בתפוקה גבוהה ולחקירות מכניסטיות של הביולוגיה של סרטן המעי הגס.

LoVo-Luc שומר על המאפיינים המולקולריים המוכרים של קו ה-LoVo ההורי, כולל הפנוטיפ של MSI, פרופיל הביטוי של אונקוגנים, וייצור האנטיגן הקרצינו-עוברי (CEA). הרפורט של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את תפוקת הניסוי ומאפשר הערכה פרמקודינמית בזמן אמת של יעילות הטיפול. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את מצב ה-MMR ואת קינטיקת הגידול בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם לפני השימוש במחקרים פרה-קליניים בקנה מידה גדול.

Tissue
גרורתי
Disease
אדנוקרצינומה של המעי הגס
Metastatic site
בלוטת לימפה על-צלעית שמאלית

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
Doubling time
24–48 שעות

04Identifiers

Citation
Lovo-Luc (מספר קטלוג Cytion 305682)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Expression and susceptibility

Antigen expression
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, סוג דם B, Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Oncogenes
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutational profile
מוטציה: p.Lys437Argfs*5, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg1114Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Met1431fs*42, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg2816Gln, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Leu15Phefs*41, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg505Cys, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Gly13Asp, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Ala292Val, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Lys128Serfs*35, הומוזיגוטית
Reverse transcriptase
שלילי
Products
אנטיגן קרצינואמבריוני (CEA) 908 נ"ג/106 תאים/10 ימים

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820608a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1–3*10^4/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
56 שנים
Ethnicity
קווקזי