Gå til innholdet
Lovo-Luc
Vev
Metastatisk
Sykdom
Adenokarsinom i tykktarmen
Metastaseområde
Venstre supraklavikulære lymfeknute

Dokumenter

Lovo-Luc

Cell line · Produktnummer 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

LoVo-Luc er et bioluminescerende derivat av den humane LoVo-cellelinjen for kolorektalt adenokarsinom, som er genetisk modifisert til å uttrykke et reportergen for ildflue-luciferase på en stabil måte. Den opprinnelige LoVo-cellelinjen ble etablert fra en metastatisk venstre supraklavikulær lymfeknute fra et kolorektalt adenokarsinom hos en 56 år gammel mannlig pasient, og er en av de mest brukte kolorektale kreftcellelinjene i kreftforskning. LoVo-celler har en epitelignende morfologi og er preget av mikrosatellittinstabilitet (MSI), mangelfull mismatch-reparasjon (dMMR) og uttrykk av onkogener, inkludert Myc, myb, ras, fos og p53. Disse egenskapene gjør LoVo til en relevant modell for å studere biologien til kolorektal kreft med mangelfull mismatch-reparasjon og terapeutiske responser, inkludert følsomhet for immunterapi.

Den stabile luciferase-integrasjonen i LoVo-Luc muliggjør følsom, kvantitativ bioluminescensavbildning (BLI) av tumorbyrden i xenotransplantasjonsmodeller med immunsvekkede verter. Det luminescerende signalet korrelerer med antall levedyktige tumorceller, noe som muliggjør ikke-invasiv, longitudinell overvåking av tumorinnpodning, vekstkinetikk og behandlingsrespons. LoVo-Luc er særlig verdifullt for prekliniske studier som evaluerer immuncheckpoint-hemmere, kjemoterapeutiske midler og målrettede terapier i sammenheng med MMR-mangelfull tykktarmskreft, samt for høykapasitets screening av legemidler og mekanistiske undersøkelser av tykktarmskreftbiologi.

LoVo-Luc beholder de etablerte molekylære egenskapene til den opprinnelige LoVo-linjen, inkludert MSI-fenotypen, onkogenuttrykkprofilen og produksjonen av karcinoembryonalt antigen (CEA). Luciferase-reporteren forbedrer den eksperimentelle gjennomstrømningen betydelig og muliggjør farmakodynamisk vurdering av behandlingseffekten i sanntid. Forskere bør verifisere luciferaseaktivitet, MMR-status og vekstkinetikk under sine spesifikke eksperimentelle forhold før bruk i storskala prekliniske studier.

Vev
Metastatisk
Sykdom
Adenokarsinom i tykktarmen
Metastaseområde
Venstre supraklavikulære lymfeknute

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
Fordoblingstid
24–48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Lovo-Luc (Cytion-katalognummer 305682)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, blodtype B, Luc2 (ildflue, kodonoptimalisert)
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogener
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutasjonsprofil
Mutasjon: p.Lys437Argfs*5, heterozygot; Mutasjon: p.Arg1114Ter, heterozygot; Mutasjon: p.Met1431fs*42, heterozygot; Mutasjon: p.Arg2816Gln, heterozygot; Mutasjon: p.Leu15Phefs*41, heterozygot; Mutasjon: p.Arg505Cys, heterozygot; Mutasjon: p.Gly13Asp, heterozygot; Mutasjon: p.Ala292Val, heterozygot; Mutasjon: p.Lys128Serfs*35, homozygot
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Karsinoembryonalt antigen (CEA) 908 ng/106 celler/10 dager

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12K Medium, m: 2,0 mM L-Glutamin, m: 2,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820608a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 3
Såtetthet
1–3 × 10⁴/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
56 år
Etnisitet
Kaukasisk