İçeriğe atla
Lovo-Luc
Doku
Metastatik
Hastalık
Kolon adenokarsinomu
Metastaz yeri
Sol supraklaviküler lenf nodu

Lovo-Luc

Cell line · Ürün numarası 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

LoVo-Luc, insan LoVo kolorektal adenokarsinom hücre hattının biyolüminesan bir türevidir ve ateşböceği lusiferaz raportör genini istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır. Ana LoVo hücre hattı, 56 yaşındaki bir erkek hastada kolorektal adenokarsinomun metastaz yapmış sol supraklaviküler lenf düğümünden elde edilmiştir ve kanser araştırmalarında en yaygın olarak kullanılan kolorektal kanser hücre hatlarından biridir. LoVo hücreleri epitel benzeri bir morfoloji sergiler ve mikrosatellit instabilitesi (MSI), yetersiz mismatch onarımı (dMMR) ve Myc, myb, ras, fos ve p53 dahil olmak üzere onkogenlerin ekspresyonu ile karakterize edilir. Bu özellikler, LoVo'yu, eşleşmeme onarım eksikliği olan kolorektal kanser biyolojisini ve immünoterapiye duyarlılık dahil olmak üzere terapötik yanıtları incelemek için uygun bir model haline getirir.

LoVo-Luc'taki stabil lusiferaz entegrasyonu, bağışıklık sistemi baskılanmış konakçılar kullanılarak yapılan ksenograft modellerinde tümör yükünün hassas ve kantitatif biyolüminesans görüntülemesini (BLI) mümkün kılar. Lüminesan sinyal, canlı tümör hücre sayısı ile korelasyon gösterir ve bu da tümörün greftlenmesi, büyüme kinetiği ve tedaviye yanıtın noninvaziv uzunlamasına izlenmesini destekler. LoVo-Luc, MMR eksikliği olan kolorektal kanser bağlamında immün kontrol noktası inhibitörlerini, kemoterapötik ajanları ve hedefe yönelik tedavileri değerlendiren preklinik çalışmaların yanı sıra, yüksek verimli ilaç taraması ve kolorektal kanser biyolojisinin mekanistik araştırmaları için özellikle değerlidir.

LoVo-Luc, MSI fenotipi, onkogen ekspresyon profili ve karsinoembriyonik antijen (CEA) üretimi dahil olmak üzere, ana LoVo hattının yerleşik moleküler özelliklerini korur. Lüseraz raportörü, deneysel verimi önemli ölçüde artırır ve tedavi etkinliğinin gerçek zamanlı farmakodinamik değerlendirmesini mümkün kılar. Araştırmacılar, büyük ölçekli preklinik çalışmalarda kullanmadan önce, kendi özel deney koşulları altında lusiferaz aktivitesini, MMR durumunu ve büyüme kinetiğini doğrulamalıdır.

Doku
Metastatik
Hastalık
Kolon adenokarsinomu
Metastaz yeri
Sol supraklaviküler lenf nodu

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde
İki katına çıkma süresi
24-48 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
Lovo-Luc (Cytion katalog numarası 305682)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, B kan grubu, Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)
İzoenzimler
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogenler
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutasyon profili
Mutasyon: p.Lys437Argfs*5, Heterozigot; Mutasyon: p.Arg1114Ter, Heterozigot; Mutasyon: p.Met1431fs*42, Heterozigot; Mutasyon: p.Arg2816Gln, Heterozigot; Mutasyon: p.Leu15Phefs*41, Heterozigot; Mutasyon: p.Arg505Cys, Heterozigot; Mutasyon: p.Gly13Asp, Heterozigot; Mutasyon: p.Ala292Val, Heterozigot; Mutasyon: p.Lys128Serfs*35, Homozigot
Ters transkriptaz
Negatif
Ürünler
Karsinoembriyonik antijen (CEA) 908 ng/106 hücre/10 gün

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamin, w: 2.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.5 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820608a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1–3 × 10⁴/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
56 yıl
Etnik köken
Kafkas