Preskoči na vsebino
Lovo-Luc
Tkivo
Metastatski
Bolezen
Adenokarcinom debelega črevesa
Mesto metastaze
Leva nadlaktna bezgavka

Dokumenti

Lovo-Luc

Cell line · Številka izdelka 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

LoVo-Luc je bioluminiscenčni derivat človeške celične linije LoVo, ki izvira iz kolorektalnega adenokarcinoma, in je bil genetsko spremenjen tako, da stabilno izraža reporterni gen luciferaze svetlikavca. Izvorna celična linija LoVo je bila vzpostavljena iz metastatskega levega supraklavikularnega limfnega vozla kolorektalnega adenokarcinoma pri 56-letnem moškem pacientu in je ena izmed najpogosteje uporabljanih celičnih linij kolorektalnega raka v raziskavah raka. Celice LoVo imajo epitelijsko podobno morfologijo in so značilne po nestabilnosti mikrosatelitov (MSI), pomanjkljivem popravljanju neskladij (dMMR) ter izražanju onkogenov, vključno z Myc, myb, ras, fos in p53. Zaradi teh značilnosti je LoVo primeren model za preučevanje biologije kolorektalnega raka z okvaro popravljanja neskladij ter terapevtskih odzivov, vključno z občutljivostjo na imunoterapijo.

Stabilna integracija luciferaze v celicah LoVo-Luc omogoča občutljivo, kvantitativno bioluminiscenčno slikanje (BLI) tumorske obremenitve v modelih ksenotransplantatov z imunsko oslabljenimi gostitelji. Luminiscenčni signal je v korelaciji s številom živih tumorskih celic, kar omogoča neinvazivno longitudinalno spremljanje prijemanja tumorja, kinetične rasti in odziva na zdravljenje. LoVo-Luc je še posebej dragocen za predklinične študije, ki ocenjujejo zaviralce imunskih kontrolnih točk, kemoterapevtska sredstva in ciljno usmerjene terapije v okviru kolorektalnega raka z okvaro MMR, pa tudi za visoko zmogljivo presejanje zdravil in mehanistične raziskave biologije kolorektalnega raka.

LoVo-Luc ohranja uveljavljene molekularne značilnosti izvorne linije LoVo, vključno z njenim fenotipom MSI, profilom ekspresije onkogenov in proizvodnjo karcinoembrionalnega antigena (CEA). Reporterna luciferaza bistveno poveča eksperimentalno zmogljivost in omogoča farmakodinamično oceno učinkovitosti zdravljenja v realnem času. Raziskovalci morajo pred uporabo v obsežnih predkliničnih študijah preveriti aktivnost luciferaze, status MMR in kinetično rast v svojih specifičnih eksperimentalnih pogojih.

Tkivo
Metastatski
Bolezen
Adenokarcinom debelega črevesa
Mesto metastaze
Leva nadlaktna bezgavka

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših
Čas podvojitve
24–48 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
Lovo-Luc (kataloška številka Cytion 305682)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, krvna skupina B, Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimizirano)
Izoenzimi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogeni
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Profil mutacij
Mutacija: p.Lys437Argfs*5, heterozigotna; Mutacija: p.Arg1114Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Met1431fs*42, heterozigotna; Mutacija: p.Arg2816Gln, heterozigotna; Mutacija: p.Leu15Phefs*41, heterozigotna; Mutacija: p.Arg505Cys, heterozigotna; Mutacija: p.Gly13Asp, heterozigotna; Mutacija: p.Ala292Val, heterozigotna; Mutacija: p.Lys128Serfs*35, homozigotna
Reversna transkriptaza
Negativni
Izdelki
Karcinoembrionalni antigen (CEA) 908 ng/106 celic/10 dni

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-glutamin, w: 2,0 mM natrijev piruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820608a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
56 let
Etnična pripadnost
Kavkaški