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Lovo-Luc
Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma del colon
Sito metastatico
Linfonodo sopraclaveare sinistro

Documenti

Lovo-Luc

Cell line · Codice prodotto 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

LoVo-Luc è un derivato bioluminescente della linea cellulare umana LoVo, derivata da un adenocarcinoma colorettale, ingegnerizzata per esprimere in modo stabile un gene reporter codificante la luciferasi della lucciola. La linea cellulare parentale LoVo è stata ottenuta da un linfonodo sopraclaveare sinistro metastatico di un adenocarcinoma colorettale in un paziente maschio di 56 anni ed è una delle linee cellulari di cancro colorettale più ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro. Le cellule LoVo presentano una morfologia di tipo epiteliale e sono caratterizzate da instabilità dei microsatelliti (MSI), deficit di riparazione dei mismatch (dMMR) ed espressione di oncogeni quali Myc, myb, ras, fos e p53. Queste caratteristiche rendono LoVo un modello rilevante per lo studio della biologia del carcinoma colorettale con deficit di riparazione del mismatch e delle risposte terapeutiche, compresa la sensibilità all’immunoterapia.

L’integrazione stabile della luciferasi in LoVo-Luc consente un’imaging bioluminescente (BLI) sensibile e quantitativo del carico tumorale in modelli di xenotrapianto che utilizzano ospiti immunocompromessi. Il segnale luminescente è correlato al numero di cellule tumorali vitali, consentendo il monitoraggio longitudinale non invasivo dell’attecchimento del tumore, della cinetica di crescita e della risposta al trattamento. LoVo-Luc è particolarmente utile per studi preclinici volti a valutare inibitori dei checkpoint immunitari, agenti chemioterapici e terapie mirate nel contesto del carcinoma colorettale con deficit di MMR, nonché per lo screening farmacologico ad alta produttività e le indagini meccanicistiche sulla biologia del carcinoma colorettale.

LoVo-Luc conserva le caratteristiche molecolari consolidate della linea parentale LoVo, tra cui il fenotipo MSI, il profilo di espressione degli oncogeni e la produzione dell’antigene carcinoembrionale (CEA). Il reporter a base di luciferasi migliora notevolmente la produttività sperimentale e consente una valutazione farmacodinamica in tempo reale dell’efficacia del trattamento. I ricercatori dovrebbero verificare l’attività della luciferasi, lo stato MMR e la cinetica di crescita nelle loro specifiche condizioni sperimentali prima dell’utilizzo in studi preclinici su larga scala.

Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma del colon
Sito metastatico
Linfonodo sopraclaveare sinistro

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi
Tempo di raddoppio
24-48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Lovo-Luc (codice catalogo Cytion 305682)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, gruppo sanguigno B, Luc2 (lucciola, ottimizzato a livello di codoni)
Isoenzimi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Oncogeni
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Profilo mutazionale
Mutazione: p.Lys437Argfs*5, eterozigote; Mutazione: p.Arg1114Ter, eterozigote; Mutazione: p.Met1431fs*42, eterozigote; Mutazione: p.Arg2816Gln, eterozigote; Mutazione: p.Leu15Phefs*41, eterozigote; Mutazione: p.Arg505Cys, eterozigote; Mutazione: p.Gly13Asp, eterozigote; Mutazione: p.Ala292Val, eterozigote; Mutazione: p.Lys128Serfs*35, omozigote
Trascriptasi inversa
Negativo
Prodotti
Antigene carcinoembrionale (CEA) 908 ng/106 cellule/10 giorni

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutammina, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,5 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820608a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
1-3*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
56 anni
Etnia
Caucasico