Přejít na obsah
Lovo-Luc
Tkáň
Metastatické
Nemoc
Adenokarcinom tlustého střeva
Místo metastázy
Levá nadklíčková lymfatická uzlina

Dokumenty

Lovo-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

LoVo-Luc je bioluminiscenční derivát lidské buněčné linie LoVo pocházející z adenokarcinomu tlustého střeva, který byl geneticky upraven tak, aby stabilně exprimoval reportérový gen luciferázy světlušky. Původní buněčná linie LoVo byla izolována z metastatické levé supraklavikulární lymfatické uzliny u 56letého pacienta s adenokarcinomem tlustého střeva a je jednou z nejčastěji používaných buněčných linií kolorektálního karcinomu v onkologickém výzkumu. Buňky LoVo vykazují epiteliální morfologii a vyznačují se mikrosatelitní nestabilitou (MSI), deficitem opravy nesouladu (dMMR) a expresí onkogenů, včetně Myc, myb, ras, fos a p53. Díky těmto vlastnostem je LoVo vhodným modelem pro studium biologie kolorektálního karcinomu s deficitem opravy nesouladu a terapeutických reakcí, včetně citlivosti na imunoterapii.

Stabilní integrace luciferázy v buňkách LoVo-Luc umožňuje citlivé, kvantitativní bioluminiscenční zobrazování (BLI) nádorové zátěže v modelech xenotransplantátů s použitím imunokompromitovaných hostitelů. Luminiscenční signál koreluje s počtem životaschopných nádorových buněk, což umožňuje neinvazivní longitudinální sledování přihojení nádoru, kinetiky růstu a odezvy na léčbu. LoVo-Luc je obzvláště cenný pro předklinické studie hodnotící inhibitory imunitních kontrolních bodů, chemoterapeutická činidla a cílené terapie v kontextu kolorektálního karcinomu s deficitem MMR, stejně jako pro vysoce výkonné screeningové testy léčiv a mechanistické výzkumy biologie kolorektálního karcinomu.

LoVo-Luc si zachovává zavedené molekulární charakteristiky mateřské linie LoVo, včetně jejího MSI fenotypu, profilu exprese onkogenů a produkce karcinoembryonálního antigenu (CEA). Luciferázový reportér podstatně zvyšuje experimentální propustnost a umožňuje farmakodynamické hodnocení účinnosti léčby v reálném čase. Výzkumníci by měli před použitím v rozsáhlých předklinických studiích ověřit aktivitu luciferázy, stav MMR a růstovou kinetiku za svých specifických experimentálních podmínek.

Tkáň
Metastatické
Nemoc
Adenokarcinom tlustého střeva
Místo metastázy
Levá nadklíčková lymfatická uzlina

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší
Doba zdvojnásobení
24–48 hodin

04Identifikátory

Citace
Lovo-Luc (katalogové číslo Cytion 305682)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, krevní skupina B, Luc2 (světluška, kodonově optimalizovaný)
Isoenzymy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogeny
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutační profil
Mutace: p.Lys437Argfs*5, heterozygotní; Mutace: p.Arg1114Ter, heterozygotní; Mutace: p.Met1431fs*42, heterozygotní; Mutace: p.Arg2816Gln, heterozygotní; Mutace: p.Leu15Phefs*41, heterozygotní; Mutace: p.Arg505Cys, heterozygotní; Mutace: p.Gly13Asp, heterozygotní; Mutace: p.Ala292Val, heterozygotní; Mutace: p.Lys128Serfs*35, homozygotní
Reverzní transkriptáza
Negativní
Produkty
Karcinoembryonální antigen (CEA) 908 ng/106 buněk/10 dní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,5 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820608a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
56 let
Etnická příslušnost
Kavkazský