Lovo-Luc
Cell line · Product number 305682
LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...
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01General information
- Description
LoVo-Luc 是人类 LoVo 结直肠腺癌细胞系的生物发光衍生物,经过基因工程改造,可稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因。 亲本 LoVo 细胞系源自一名 56 岁男性患者结直肠腺癌的左侧锁骨上淋巴结转移灶,是癌症研究中应用最广泛的结直肠癌细胞系之一。 LoVo 细胞表现出上皮样形态,其特征为微卫星不稳定性 (MSI)、错配修复缺陷 (dMMR) 以及表达包括 Myc、myb、ras、fos 和 p53 在内的致癌基因。 这些特征使LoVo成为研究错配修复缺陷型结直肠癌生物学特性及治疗反应(包括对免疫治疗的敏感性)的理想模型。
LoVo-Luc中稳定的荧光素酶整合,使得利用免疫缺陷宿主进行异种移植模型中的肿瘤负荷敏感、定量生物发光成像(BLI)成为可能。发光信号与存活肿瘤细胞数量相关,支持对肿瘤植入、生长动力学及治疗反应进行无创纵向监测。 LoVo-Luc 在针对 MMR 缺陷型结直肠癌评估免疫检查点抑制剂、化疗药物和靶向治疗的临床前研究中具有特别重要的价值,同时也适用于高通量药物筛选以及结直肠癌生物学机制的研究。
LoVo-Luc 保留了亲本 LoVo 细胞系的已知分子特征,包括其微卫星不稳定性(MSI)表型、致癌基因表达谱以及癌胚抗原(CEA)的产生。荧光素酶报告基因显著提高了实验通量,并能够对治疗疗效进行实时药效学评估。 研究人员在将其用于大规模临床前研究之前,应根据具体实验条件验证荧光素酶活性、MMR状态及细胞生长动力学。
- Tissue
- 转移性
- Disease
- 结肠腺癌
- Metastatic site
- 左锁骨上淋巴结
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 是,在裸鼠身上
- Doubling time
- 24-48小时
04Identifiers
- Citation
- Lovo-Luc(Cytion 产品编号 305682)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y03
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- HLA A11、B15、B17、Cw1、Cw3、B型血、Luc2(萤火虫,密码子优化)
- Isoenzymes
- G6PD,B,PGM1,2,PGM3,1-2,6PGD,A,ES-D,1
- Oncogenes
- Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Mutational profile
- 突变:p.Lys437Argfs*5,杂合子;突变:p.Arg1114Ter,杂合子;突变:p.Met1431fs*42,杂合子; 突变:p.Arg2816Gln,杂合子;突变:p.Leu15Phefs*41,杂合子;突变:p.Arg505Cys,杂合子; 突变:p.Gly13Asp,杂合子;突变:p.Ala292Val,杂合子;突变:p.Lys128Serfs*35,纯合子
- Reverse transcriptase
- 阴性
- Products
- 癌胚抗原 (CEA) 908 纳克/106 个细胞/10 天
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12K 培养基,w:2.0 mM L-谷氨酰胺,w:2.0 mM 丙酮酸钠,w:2.5 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820608a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Split ratio
- 1 至 3
- Seeding density
- 1-3×10⁴/cm²
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 56 岁
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
