
- Chusteczka
- Przerzuty
- Choroba
- Gruczolakorak okrężnicy
- Miejsce przerzutów
- Lewy nadobojczykowy węzeł chłonny
Dokumenty
Lovo-Luc
Cell line · Numer produktu 305682
LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...
Dostosowanie / Zalecenia
- Lovo-LucCell line€777.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
LoVo-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej LoVo pochodzącej z gruczolakoraka jelita grubego, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa LoVo została wyizolowana z przerzutowego lewego węzła chłonnego nadobojczykowego u 56-letniego pacjenta z gruczolakorakiem jelita grubego i jest jedną z najczęściej stosowanych linii komórkowych raka jelita grubego w badaniach nad rakiem. Komórki LoVo wykazują morfologię podobną do komórek nabłonkowych i charakteryzują się niestabilnością mikrosatelitarową (MSI), niedoborem naprawy niedopasowań (dMMR) oraz ekspresją onkogenów, w tym Myc, myb, ras, fos i p53. Cechy te sprawiają, że LoVo stanowi odpowiedni model do badania biologii raka jelita grubego z niedoborem naprawy niedopasowań oraz odpowiedzi na leczenie, w tym wrażliwości na immunoterapię.
Stabilna integracja lucyferazy w linii LoVo-Luc umożliwia czułe, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach przeszczepów heterogenicznych z wykorzystaniem gospodarzy z obniżoną odpornością. Sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, co pozwala na nieinwazyjne monitorowanie w czasie przebiegu wszczepienia nowotworu, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leczenie. Linia LoVo-Luc jest szczególnie cenna w badaniach przedklinicznych oceniających inhibitory punktów kontrolnych układu odpornościowego, środki chemioterapeutyczne oraz terapie celowane w kontekście raka jelita grubego z niedoborem MMR, a także w wysokoprzepustowym przesiewaniu leków i badaniach mechanistycznych dotyczących biologii raka jelita grubego.
LoVo-Luc zachowuje ustalone cechy molekularne macierzystej linii LoVo, w tym fenotyp MSI, profil ekspresji onkogenów oraz produkcję antygenu rakowo-płodowego (CEA). Reporter lucyferazy znacznie zwiększa wydajność eksperymentalną i umożliwia farmakodynamiczną ocenę skuteczności leczenia w czasie rzeczywistym. Przed zastosowaniem w badaniach przedklinicznych na dużą skalę naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, status MMR oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.
- Chusteczka
- Przerzuty
- Choroba
- Gruczolakorak okrężnicy
- Miejsce przerzutów
- Lewy nadobojczykowy węzeł chłonny
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Nowotworotwórczy
- Tak, u nagich myszy
- Czas podwojenia
- 24–48 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- Lovo-Luc (numer katalogowy Cytion 305682)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y03
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja antygenu
- HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, grupa krwi B, Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
- Izoenzymy
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
- Onkogeny
- Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Profil mutacji
- Mutacja: p.Lys437Argfs*5, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg1114Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Met1431fs*42, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg2816Gln, heterozygotyczna; Mutacja: p.Leu15Phefs*41, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg505Cys, heterozygotyczna; Mutacja: p.Gly13Asp, heterozygotyczna; Mutacja: p.Ala292Val, heterozygotyczna; Mutacja: p.Lys128Serfs*35, homozygotyczna
- Transkryptaza odwrotna
- Negatywny
- Produkty
- Antygen rakowo-płodowy (CEA) 908 ng/106 komórek/10 dni
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Pożywka Ham's F12K, w: 2,0 mM L-glutamina, w: 2,0 mM pirogronian sodu, w: 2,5 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820608a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 3
- Gęstość wysiewu
- 1–3 × 10⁴/cm²
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 56 lat
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak