Przejdź do treści
Lovo-Luc
Chusteczka
Przerzuty
Choroba
Gruczolakorak okrężnicy
Miejsce przerzutów
Lewy nadobojczykowy węzeł chłonny

Dokumenty

Lovo-Luc

Cell line · Numer produktu 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

LoVo-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej LoVo pochodzącej z gruczolakoraka jelita grubego, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa LoVo została wyizolowana z przerzutowego lewego węzła chłonnego nadobojczykowego u 56-letniego pacjenta z gruczolakorakiem jelita grubego i jest jedną z najczęściej stosowanych linii komórkowych raka jelita grubego w badaniach nad rakiem. Komórki LoVo wykazują morfologię podobną do komórek nabłonkowych i charakteryzują się niestabilnością mikrosatelitarową (MSI), niedoborem naprawy niedopasowań (dMMR) oraz ekspresją onkogenów, w tym Myc, myb, ras, fos i p53. Cechy te sprawiają, że LoVo stanowi odpowiedni model do badania biologii raka jelita grubego z niedoborem naprawy niedopasowań oraz odpowiedzi na leczenie, w tym wrażliwości na immunoterapię.

Stabilna integracja lucyferazy w linii LoVo-Luc umożliwia czułe, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach przeszczepów heterogenicznych z wykorzystaniem gospodarzy z obniżoną odpornością. Sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, co pozwala na nieinwazyjne monitorowanie w czasie przebiegu wszczepienia nowotworu, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leczenie. Linia LoVo-Luc jest szczególnie cenna w badaniach przedklinicznych oceniających inhibitory punktów kontrolnych układu odpornościowego, środki chemioterapeutyczne oraz terapie celowane w kontekście raka jelita grubego z niedoborem MMR, a także w wysokoprzepustowym przesiewaniu leków i badaniach mechanistycznych dotyczących biologii raka jelita grubego.

LoVo-Luc zachowuje ustalone cechy molekularne macierzystej linii LoVo, w tym fenotyp MSI, profil ekspresji onkogenów oraz produkcję antygenu rakowo-płodowego (CEA). Reporter lucyferazy znacznie zwiększa wydajność eksperymentalną i umożliwia farmakodynamiczną ocenę skuteczności leczenia w czasie rzeczywistym. Przed zastosowaniem w badaniach przedklinicznych na dużą skalę naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, status MMR oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Przerzuty
Choroba
Gruczolakorak okrężnicy
Miejsce przerzutów
Lewy nadobojczykowy węzeł chłonny

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy
Czas podwojenia
24–48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
Lovo-Luc (numer katalogowy Cytion 305682)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, grupa krwi B, Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogeny
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Profil mutacji
Mutacja: p.Lys437Argfs*5, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg1114Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Met1431fs*42, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg2816Gln, heterozygotyczna; Mutacja: p.Leu15Phefs*41, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg505Cys, heterozygotyczna; Mutacja: p.Gly13Asp, heterozygotyczna; Mutacja: p.Ala292Val, heterozygotyczna; Mutacja: p.Lys128Serfs*35, homozygotyczna
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
Antygen rakowo-płodowy (CEA) 908 ng/106 komórek/10 dni

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Pożywka Ham's F12K, w: 2,0 mM L-glutamina, w: 2,0 mM pirogronian sodu, w: 2,5 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820608a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
1–3 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
56 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski