Mine otse sisu juurde
Lovo-Luc
Kude
Metastaatiline
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne supraklavikulaarne lümfisõlm

Dokumendid

Lovo-Luc

Cell line · Toote number 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LoVo-Luc on inimese LoVo kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseeriks stabiilselt tulikärbse lucifereesi reportergeeni. Algne LoVo rakuliin loodi 56-aastase meespatsiendi kolorektaalse adenokartsinoomi metastaatilise vasaku supraklavikulaarse lümfisõlme põhjal ning on üks vähktõveuuringutes enim kasutatavaid kolorektaalse vähi rakuliine. LoVo-rakud on epiteelilaadse morfoloogiaga ning neile on iseloomulik mikrosatelliitide ebastabiilsus (MSI), puudulik mismatch-parandus (dMMR) ja onkogeenide, sealhulgas Myc, myb, ras, fos ja p53 ekspressioon. Need omadused teevad LoVo-st asjakohase mudeli mismatch-parandusdefitsiidiga kolorektaalvähi bioloogia ja ravivastuste, sealhulgas immunoteraapia suhtes tundlikkuse uurimiseks.

Stabiilne lusiferaasi integratsioon LoVo-Luc-is võimaldab immuunpuudulikkusega peremeesorganismidel kasutatavates ksenotransplantaadi mudelites teostada tundlikku ja kvantitatiivset bioluminestsentskuvamist (BLI) kasvajakoormuse hindamiseks. Luminestsentssignaal korreleerub eluvõimeliste kasvajarakkude arvuga, toetades kasvaja juurdumise, kasvukineetika ja ravivastuse mitteinvasiivset pikaajalist jälgimist. LoVo-Luc on eriti väärtuslik prekliinilistes uuringutes, kus hinnatakse immuunkontrollpunkti inhibiitoreid, kemoteraapiavahendeid ja sihtterapioid MMR-defitsiidiga kolorektaalvähi kontekstis, samuti suure läbilaskevõimega ravimite sõelumisel ja kolorektaalvähi bioloogia mehhanismide uurimisel.

LoVo-Luc säilitab emaliini LoVo väljakujunenud molekulaarsed omadused, sealhulgas MSI-fenotüübi, onkogeeni ekspressiooniprofiili ja kartsinoembrüonaalse antigeeni (CEA) tootmise. Lusiferase-reporter suurendab oluliselt eksperimendi läbilaskevõimet ja võimaldab ravi tõhususe reaalajas farmakodünaamilist hindamist. Teadlased peaksid enne laiaulatuslikes prekliinilistes uuringutes kasutamist kontrollima lusiferaasi aktiivsust, MMR-staatust ja kasvukineetikat oma konkreetsetes katsetingimustes.

Kude
Metastaatiline
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne supraklavikulaarne lümfisõlm

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Kahekordistumisaeg
24–48 tundi

04Tunnused

Viide
Lovo-Luc (Cytioni katalooginumber 305682)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, veregrupp B, Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogeenid
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: p.Lys437Argfs*5, heterosügootne; Mutatsioon: p.Arg1114Ter, heterosügootne; Mutatsioon: p.Met1431fs*42, heterosügootne; Mutatsioon: p.Arg2816Gln, heterosügootne; Mutatsioon: p.Leu15Phefs*41, heterosügootne; Mutatsioon: p.Arg505Cys, heterosügootne; Mutatsioon: p.Gly13Asp, heterosügootne; Mutatsioon: p.Ala292Val, heterosügootne; Mutatsioon: p.Lys128Serfs*35, homosügootne
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Kartsiinoembüooniline antigeen (CEA) 908 ng/106 rakku/10 päeva

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820608a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
56 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia