Tartalomra ugrás
Lovo-Luc
Szövet
Metasztatikus
Betegség
Vastagbél adenokarcinóma
Áttétes hely
Bal supraclavicularis nyirokcsomó

Dokumentumok

Lovo-Luc

Cell line · Termékszám 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A LoVo-Luc az emberi LoVo kolorektális adenokarcinóma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a szentjánosbogár-luciferáz riportergént. Az eredeti LoVo sejtvonalat egy 56 éves férfi beteg kolorektális adenokarcinómájának metasztatikus bal supraclavicularis nyirokcsomójából állították elő, és ez az egyik legszélesebb körben használt kolorektális ráksejtvonal a rákkutatásban. A LoVo-sejtek epiteliális jellegű morfológiát mutatnak, és mikroszatellit-instabilitás (MSI), hiányos mismatch-javítás (dMMR), valamint olyan onkogének expressziója jellemzi őket, mint a Myc, myb, ras, fos és p53. Ezek a jellemzők teszik a LoVo-t releváns modellé a mismatch-javítási hiányossággal járó kolorektális rák biológiájának és terápiás válaszainak – beleértve az immunterápiára való érzékenységet is – tanulmányozásához.

A LoVo-Luc-ban található stabil luciferáz-integráció lehetővé teszi a tumorterhelés érzékeny, kvantitatív biolumineszcens képalkotását (BLI) immunhiányos gazdaszervezeteket felhasználó xenotranszplantációs modellekben. A lumineszcens jel korrelál az életképes tumorsejtek számával, ami támogatja a tumor beültetésének, növekedési kinetikájának és a kezelésre adott válasz nem invazív, longitudinális monitorozását. A LoVo-Luc különösen értékes az MMR-hiányos kolorektális rák kontextusában az immunellenőrző pont-gátlók, a kemoterápiás szerek és a célzott terápiák értékelésére irányuló preklinikai vizsgálatokhoz, valamint a nagy áteresztőképességű gyógyszerszűréshez és a kolorektális rák biológiájának mechanisztikus kutatásához.

A LoVo-Luc megőrzi a szülői LoVo-vonal jól ismert molekuláris jellemzőit, beleértve az MSI-fenotípust, az onkogén-expressziós profilt és a karcinoembrionális antigén (CEA) termelését. A luciferáz-riporter jelentősen növeli a kísérleti áteresztőképességet, és lehetővé teszi a kezelés hatékonyságának valós idejű farmakodinamikai értékelését. A kutatóknak a nagyszabású preklinikai vizsgálatokban való felhasználás előtt saját kísérleti körülményeik között ellenőrizniük kell a luciferáz-aktivitást, az MMR-státuszt és a növekedési kinetikát.

Szövet
Metasztatikus
Betegség
Vastagbél adenokarcinóma
Áttétes hely
Bal supraclavicularis nyirokcsomó

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben
Kettőzési idő
24–48 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
Lovo-Luc (Cytion katalógusszám: 305682)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, B vércsoport, Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)
Izoenzimek
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogének
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -, src -
Mutációs profil
Mutáció: p.Lys437Argfs*5, heterozigóta; Mutáció: p.Arg1114Ter, heterozigóta; Mutáció: p.Met1431fs*42, heterozigóta; Mutáció: p.Arg2816Gln, heterozigóta; Mutáció: p.Leu15Phefs*41, heterozigóta; Mutáció: p.Arg505Cys, heterozigóta; Mutáció: p.Gly13Asp, heterozigóta; Mutáció: p.Ala292Val, heterozigóta; Mutáció: p.Lys128Serfs*35, homozigóta
Fordított transzkriptáz
Negatív
Termékek
Karcinoembrionális antigén (CEA) 908 ng/106 sejt/10 nap

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12K médium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820608a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
56 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi