Prejsť na obsah
Lovo-Luc
Tkanivo
Metastatické
Choroba
Adenokarcinóm hrubého čreva
Miesto metastáz
Ľavá supraklavikulárna lymfatická uzlina

Dokumenty

Lovo-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

LoVo-Luc je bioluminiscenčný derivát ľudskej buneckej línie LoVo pochádzajúcej z kolorektálneho adenokarcinómu, ktorá bola geneticky upravená tak, aby stabilne exprimovala reportérový gén luciferázy svätojánskej mušky. Pôvodná bunková línia LoVo bola izolovaná z metastatického ľavého supraklavikulárneho lymfatického uzla kolorektálneho adenokarcinómu u 56-ročného mužského pacienta a patrí medzi najčastejšie používané bunkové línie kolorektálneho karcinómu vo výskume rakoviny. Bunky LoVo vykazujú epiteliálnu morfológiu a vyznačujú sa mikrosatelitnou nestabilitou (MSI), deficitom opravy nesúladu (dMMR) a expresiou onkogénov vrátane Myc, myb, ras, fos a p53. Vďaka týmto vlastnostiam je LoVo relevantným modelom na štúdium biológie kolorektálneho karcinómu s deficitom opravy nesúladu a terapeutických odpovedí, vrátane citlivosti na imunoterapiu.

Stabilná integrácia luciferázy v LoVo-Luc umožňuje citlivé, kvantitatívne bioluminiscenčné zobrazovanie (BLI) nádorovej záťaže v modeloch s xenotransplantátmi s využitím imunokompromitovaných hostiteľov. Luminiscenčný signál koreluje s počtom životaschopných nádorových buniek, čo umožňuje neinvazívne longitudinálne sledovanie prihojenia nádoru, kinetiky rastu a odpovede na liečbu. LoVo-Luc je obzvlášť cenný pre predklinické štúdie hodnotiace inhibítory imunitných kontrolných bodov, chemoterapeutické látky a cielené terapie v kontexte kolorektálneho karcinómu s deficitom MMR, ako aj pre vysokokapacitné skríningy liekov a mechanistické skúmanie biológie kolorektálneho karcinómu.

LoVo-Luc si zachováva etablované molekulárne charakteristiky rodičovskej línie LoVo, vrátane jej fenotypu MSI, profilu expresie onkogénov a produkcie karcinoembryonálneho antigénu (CEA). Reportér luciferázy podstatne zvyšuje experimentálnu priepustnosť a umožňuje farmakodynamické hodnotenie účinnosti liečby v reálnom čase. Výskumníci by mali pred použitím v rozsiahlych predklinických štúdiách overiť aktivitu luciferázy, stav MMR a kinetiku rastu za svojich špecifických experimentálnych podmienok.

Tkanivo
Metastatické
Choroba
Adenokarcinóm hrubého čreva
Miesto metastáz
Ľavá supraklavikulárna lymfatická uzlina

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach
Doba zdvojnásobenia
24–48 hodín

04Identifikátory

Citácia
Lovo-Luc (katalógové číslo Cytion 305682)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, krvná skupina B, Luc2 (svetluška, s optimalizovanými kodónmi)
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogény
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutčný profil
Mutácia: p.Lys437Argfs*5, heterozygotná; Mutácia: p.Arg1114Ter, heterozygotná; Mutácia: p.Met1431fs*42, heterozygotná; Mutácia: p.Arg2816Gln, heterozygotná; Mutácia: p.Leu15Phefs*41, heterozygotná; Mutácia: p.Arg505Cys, heterozygotná; Mutácia: p.Gly13Asp, heterozygotná; Mutácia: p.Ala292Val, heterozygotná; Mutácia: p.Lys128Serfs*35, homozygotná
Reverzná transkriptáza
Negatívne
Produkty
Karcinoembryonálny antigén (CEA) 908 ng/106 buniek/10 dní

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Hamovo médium F12K, w: 2,0 mM L-glutamín, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,5 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820608a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
56 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský