Gå direkte til indholdet
Lovo-Luc
Væv
Metastatisk
Sygdom
Adenokarcinom i tyktarmen
Metastasested
Venstre supraklavikulær lymfeknude

Dokumenter

Lovo-Luc

Cell line · Varenummer 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

LoVo-Luc er et bioluminescerende derivat af den humane LoVo-cellelinje fra kolorektalt adenokarcinom, der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke et reportergen baseret på ildflue-luciferase. Den oprindelige LoVo-cellelinje blev etableret ud fra en metastatisk venstre supraklavikulær lymfeknude fra et kolorektalt adenokarcinom hos en 56-årig mandlig patient og er en af de mest anvendte kolorektale kræftcellelinjer inden for kræftforskning. LoVo-celler udviser epitelagtig morfologi og er karakteriseret ved mikrosatellitustabilitet (MSI), mangelfuld mismatch-reparation (dMMR) og ekspression af onkogener, herunder Myc, myb, ras, fos og p53. Disse egenskaber gør LoVo til en relevant model til undersøgelse af biologien bag kolorektal kræft med mangelfuld mismatch-reparation samt terapeutiske responser, herunder følsomhed over for immunterapi.

Den stabile luciferase-integration i LoVo-Luc muliggør følsom, kvantitativ bioluminescensbilleddannelse (BLI) af tumorbyrden i xenotransplantatmodeller ved brug af immunsvækkede værter. Det luminescerende signal korrelerer med antallet af levedygtige tumorceller, hvilket understøtter ikke-invasiv, langvarig overvågning af tumorens inkorporering, vækstkinetik og behandlingsrespons. LoVo-Luc er særligt værdifuld til prækliniske studier, der evaluerer immuncheckpoint-hæmmere, kemoterapeutiske midler og målrettede terapier i forbindelse med MMR-defekt kolorektal cancer, samt til højkapacitetslægemiddelscreening og mekanistiske undersøgelser af kolorektal cancers biologi.

LoVo-Luc bevarer de etablerede molekylære egenskaber fra den oprindelige LoVo-stamme, herunder dens MSI-fænotype, onkogenekspressionsprofil og produktion af karcinoembryonalt antigen (CEA). Luciferase-reporteren forbedrer den eksperimentelle gennemstrømning væsentligt og muliggør farmakodynamisk vurdering af behandlingseffektiviteten i realtid. Forskere bør verificere luciferaseaktivitet, MMR-status og vækstkinetik under deres specifikke eksperimentelle betingelser, inden den anvendes i prækliniske studier i stor skala.

Væv
Metastatisk
Sygdom
Adenokarcinom i tyktarmen
Metastasested
Venstre supraklavikulær lymfeknude

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus
Fordoblingstid
24–48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Lovo-Luc (Cytion-katalognummer 305682)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, blodtype B, Luc2 (ildflue, kodonoptimeret)
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogener
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutationsprofil
Mutation: p.Lys437Argfs*5, heterozygot; Mutation: p.Arg1114Ter, heterozygot; Mutation: p.Met1431fs*42, heterozygot; Mutation: p.Arg2816Gln, heterozygot; Mutation: p.Leu15Phefs*41, heterozygot; Mutation: p.Arg505Cys, heterozygot; Mutation: p.Gly13Asp, heterozygot; Mutation: p.Ala292Val, heterozygot; Mutation: p.Lys128Serfs*35, homozygot
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 908 ng/106 celler/10 dage

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Ham's F12K Medium, m: 2,0 mM L-Glutamin, m: 2,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820608a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
1–3 × 10⁴/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
56 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk