Ga naar de inhoud
Lovo-Luc
Weefsel
Uitgezaaid
Ziekte
Colonadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Linker supraclaviculaire lymfeklier

Documenten

Lovo-Luc

Cell line · Productnummer 305682

LoVo-Luc is a bioluminescent derivative of the human LoVo colorectal adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter ...

€777.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

LoVo-Luc is een bioluminescent derivaat van de menselijke LoVo-cellijn voor colorectaal adenocarcinoom, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke LoVo-cellijn is geïsoleerd uit een gemetastaseerde linker supraclaviculaire lymfeklier van een colorectaal adenocarcinoom bij een 56-jarige mannelijke patiënt en is een van de meest gebruikte colorectale kankercellijnen in kankeronderzoek. LoVo-cellen vertonen een epitheelachtige morfologie en worden gekenmerkt door microsatellietinstabiliteit (MSI), deficiënte mismatch-reparatie (dMMR) en de expressie van oncogenen, waaronder Myc, myb, ras, fos en p53. Deze kenmerken maken LoVo tot een relevant model voor het bestuderen van de biologie van colorectale kanker met deficiënte mismatch-reparatie en van therapeutische reacties, waaronder gevoeligheid voor immuuntherapie.

De stabiele integratie van luciferase in LoVo-Luc maakt gevoelige, kwantitatieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) van de tumorbelasting mogelijk in xenotransplantaatmodellen met immuungecompromitteerde gastheerorganismen. Het luminescentiesignaal correleert met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat niet-invasieve longitudinale monitoring van de tumorengrafting, de groeikinetiek en de respons op de behandeling ondersteunt. LoVo-Luc is bijzonder waardevol voor preklinische studies ter evaluatie van immuuncheckpointremmers, chemotherapeutica en gerichte therapieën in de context van MMR-deficiënte colorectale kanker, evenals voor high-throughput-geneesmiddelenscreening en mechanistisch onderzoek naar de biologie van colorectale kanker.

LoVo-Luc behoudt de gevestigde moleculaire kenmerken van de oorspronkelijke LoVo-lijn, waaronder het MSI-fenotype, het oncogene-expressieprofiel en de productie van carcino-embryonaal antigeen (CEA). De luciferase-reporter verhoogt de experimentele doorvoer aanzienlijk en maakt realtime farmacodynamische beoordeling van de effectiviteit van de behandeling mogelijk. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, de MMR-status en de groeikinetiek onder hun specifieke experimentele omstandigheden te verifiëren alvorens deze lijn in grootschalige preklinische studies te gebruiken.

Weefsel
Uitgezaaid
Ziekte
Colonadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Linker supraclaviculaire lymfeklier

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen
Verdubbelingstijd
24-48 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Lovo-Luc (Cytion-catalogusnummer 305682)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y03

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, bloedgroep B, Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Oncogenen
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutatieprofiel
Mutatie: p.Lys437Argfs*5, heterozygoot; Mutatie: p.Arg1114Ter, heterozygoot; Mutatie: p.Met1431fs*42, heterozygoot; Mutatie: p.Arg2816Gln, heterozygoot; Mutatie: p.Leu15Phefs*41, heterozygoot; Mutatie: p.Arg505Cys, heterozygoot; Mutatie: p.Gly13Asp, heterozygoot; Mutatie: p.Ala292Val, heterozygoot; Mutatie: p.Lys128Serfs*35, homozygoot
Reverse transcriptase
Negatief
Producten
Carcino-embryonaal antigeen (CEA) 908 ng/106 cellen/10 dagen

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12K-medium, w: 2,0 mM L-glutamine, w: 2,0 mM natriumpyruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion-artikelnummer 820608a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
56 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch