Pereiti prie turinio
M2-10B4
Audinys
Kaulų čiulpai
Sinonimai
M210B4

Dokumentai

M2-10B4

Cell line · Prekės numeris 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

M2-10B4 ląstelių linija yra klonas, gautas iš kaulų čiulpų stromos ląstelių, gautų iš (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 pelės. Šios stromos ląstelės yra esminiai kaulų čiulpų mikroaplinkos komponentai ir atlieka svarbų vaidmenį palaikant kraujodarą. M2-10B4 ląstelės yra ypač vertingos atliekant tyrimus, skirtus stromos ir kraujodaros ląstelių sąveikai tirti, nes jos gali palaikyti ir žmogaus, ir pelės mielopoezę ilgalaikėje kultūroje. Be to, šios ląstelės gali palaikyti tam tikras nuo pelės stromos ląstelių priklausomas pre-B ląstelių linijas in vitro, todėl jos yra universali priemonė kraujodaros tyrimams.

M2-10B4 ląstelės išreiškia svarbius ekstraląstelinio matrikso komponentus, tokius kaip lamininas ir kolagenas IV, kurie prisideda prie jų gebėjimo palaikyti kraujodaros ląsteles. Tačiau jos neišreiškia kolageno I ir VIII faktoriaus, o tai jas skiria nuo kitų stromos ląstelių linijų. Laminino ir kolageno IV buvimas yra labai svarbus kaulų čiulpų mikroaplinkos palaikymui, nes daro įtaką ląstelių sukibimui, diferenciacijai ir signaliniams keliams. Mokslininkai dažnai naudoja M2-10B4 ląstelių liniją bendrakultūrinėse sistemose, siekdami ištirti stromos ląstelių poveikį kraujodaros progenitorių elgsenai, ypač atsižvelgiant į kaulų čiulpų fiziologiją ir ligų modelius.

Atsižvelgiant į jų kilmę ir funkcines savybes, M2-10B4 ląstelės yra labai svarbus modelis kaulų čiulpų nišai tirti, ypač atsižvelgiant į hematologinius sutrikimus, tokius kaip leukemija. Jos taip pat naudingos vaistų atrankai ir terapinių strategijų, nukreiptų į kaulų čiulpų mikroaplinką, kūrimui.

Audinys
Kaulų čiulpai
Sinonimai
  • M210B4

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
M2-10B4 (Cytion katalogo numeris 400428)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Išraiška ir jautrumas

Produktai
Lamininas, kolagenas IV (kolagenas I(-), faktorius VIII(-).

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius gyvybingumas gali būti mažas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C57BL/6J x C3H/HeJ
Donoro amžius
Nenustatyta