Tartalomra ugrás
M2-10B4
Szövet
Csontvelő
Szinonimák
M210B4

Dokumentumok

M2-10B4

Cell line · Termékszám 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az M2-10B4 sejtvonal egy (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 egérből származó csontvelő-stroma sejtekből származó klón. Ezek a stróma sejtek a csontvelő mikrokörnyezetének lényeges összetevői, és jelentős szerepet játszanak a vérképzés támogatásában. Az M2-10B4 sejtek különösen értékesek a stromális és vérképző sejtek közötti kölcsönhatásokra összpontosító kutatások számára, mivel hosszú távú tenyésztésben mind a humán, mind az egér myelopoiesist képesek támogatni. Ezen túlmenően ezek a sejtek képesek in vitro fenntartani bizonyos egér stromasejt-függő pre-B sejtvonalakat, ami sokoldalú eszközzé teszi őket a vérképzőszervi kutatásokban.

Az M2-10B4 sejtek olyan fontos extracelluláris mátrix komponenseket expresszálnak, mint a laminin és a kollagén IV, amelyek hozzájárulnak a vérképző sejtek támogatására való képességükhöz. Nem expresszálnak azonban kollagén I-et vagy VIII-as faktort, ami megkülönbözteti őket más stroma sejtvonalaktól. A laminin és a kollagén IV jelenléte kritikus fontosságú a csontvelő mikrokörnyezet fenntartásában, mivel befolyásolja a sejtek adhézióját, differenciálódását és a jelátviteli útvonalakat. A kutatók gyakran használják az M2-10B4 sejtvonalat ko-kultúrás rendszerekben a stromasejteknek a vérképzőszervi elődsejtek viselkedésére gyakorolt hatásainak vizsgálatára, különösen a csontvelő fiziológiájával és a betegségmodellekkel összefüggésben.

Eredetük és funkcionális tulajdonságaik miatt az M2-10B4 sejtek alapvető modellnek számítanak a csontvelő niche tanulmányozásához, különösen az olyan hematológiai rendellenességekkel kapcsolatban, mint a leukémia. Hasznosak továbbá a gyógyszerszűrésben és a csontvelő mikrokörnyezetét célzó terápiás stratégiák kifejlesztésében is.

Szövet
Csontvelő
Szinonimák
  • M210B4

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű
Sejttípus
Fibroblasztok

04Azonosítók

Hivatkozás
M2-10B4 (Cytion katalógusszám 400428)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Kifejeződés és fogékonyság

Termékek
Laminin, kollagén IV (kollagén I(-), VIII(-) faktor.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
A felolvasztás után az életképesség alacsony lehet.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6J x C3H/HeJ
Az adományozó életkora
Meghatározatlan