Skip to content
M2-10B4
Tissue
Tủy xương
Synonyms
M210B4

Documents

M2-10B4

Cell line · Product number 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào M2-10B4 là một dòng tế bào được phân lập từ tế bào mô liên kết tủy xương của chuột (C57BL/6J × C3H/HeJ)F1. Các tế bào mô liên kết này là thành phần thiết yếu của môi trường vi mô tủy xương và đóng vai trò quan trọng trong việc hỗ trợ quá trình tạo máu. Các tế bào M2-10B4 đặc biệt hữu ích cho nghiên cứu tập trung vào tương tác giữa các tế bào tủy xương và tế bào tạo máu, vì chúng có thể hỗ trợ quá trình tạo máu tủy xương ở cả người và chuột trong nuôi cấy lâu dài. Ngoài ra, các tế bào này có thể duy trì một số dòng tế bào tiền B phụ thuộc vào tế bào tủy xương chuột trong ống nghiệm, khiến chúng trở thành công cụ đa năng trong nghiên cứu tạo máu.

Các tế bào M2-10B4 biểu hiện các thành phần ma trận ngoại bào quan trọng như laminin và collagen IV, góp phần vào khả năng hỗ trợ các tế bào tạo máu của chúng. Tuy nhiên, chúng không biểu hiện collagen I hoặc Factor VIII, điều này phân biệt chúng với các dòng tế bào mô liên kết khác. Sự hiện diện của laminin và collagen IV là yếu tố quan trọng trong việc duy trì môi trường vi mô tủy xương, ảnh hưởng đến sự bám dính, phân hóa và các con đường tín hiệu của tế bào. Các nhà nghiên cứu thường sử dụng dòng tế bào M2-10B4 trong các hệ thống đồng nuôi cấy để khám phá tác động của tế bào mô liên kết đối với hành vi của tiền thân tạo máu, đặc biệt trong bối cảnh sinh lý tủy xương và các mô hình bệnh lý.

Do nguồn gốc và đặc tính chức năng của mình, các tế bào M2-10B4 là mô hình thiết yếu để nghiên cứu ngách tủy xương, đặc biệt liên quan đến các rối loạn huyết học như bệnh bạch cầu. Chúng cũng hữu ích trong sàng lọc thuốc và phát triển các chiến lược điều trị nhắm vào môi trường vi mô của tủy xương.

Tissue
Tủy xương
Synonyms
  • M210B4

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast
Cell type
Tế bào sợi

04Identifiers

Citation
M2-10B4 (Số catalog Cytion 400428)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Expression and susceptibility

Products
Laminin, collagen IV (Collagen I(-), Yếu tố VIII(-).

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Khả năng sống sót có thể thấp sau khi rã đông.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J × C3H/HeJ
Donor age
Không xác định