Перейти до вмісту
M2-10B4
Тканина
Кістковий мозок
Синоніми
M210B4

Документи

M2-10B4

Cell line · Номер товару 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія M2-10B4 - це клон, отриманий зі стромальних клітин кісткового мозку миші (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1. Ці стромальні клітини є важливими компонентами мікрооточення кісткового мозку і відіграють значну роль у підтримці кровотворення. Клітини M2-10B4 є особливо цінними для досліджень, спрямованих на вивчення взаємодії між стромальними та гемопоетичними клітинами, оскільки вони можуть підтримувати мієлопоез як у людини, так і у миші в умовах тривалого культивування. Крім того, ці клітини можуть підтримувати певні мишачі стромально-клітинно залежні лінії пре-В-клітин in vitro, що робить їх універсальним інструментом у дослідженнях кровотворення.

Клітини M2-10B4 експресують важливі компоненти позаклітинного матриксу, такі як ламінін і колаген IV, які сприяють їх здатності підтримувати гемопоетичні клітини. Однак вони не експресують колаген I або фактор VIII, що відрізняє їх від інших стромальних клітинних ліній. Наявність ламініну і колагену IV є критично важливою для підтримки мікрооточення кісткового мозку, впливаючи на адгезію, диференціацію і сигнальні шляхи клітин. Дослідники часто використовують клітинну лінію M2-10B4 в системах спільного культивування для вивчення впливу стромальних клітин на поведінку гемопоетичних попередників, особливо в контексті фізіології кісткового мозку та моделей захворювань.

Враховуючи їх походження та функціональні властивості, клітини M2-10B4 є важливою моделлю для вивчення ніші кісткового мозку, особливо у зв'язку з гематологічними захворюваннями, такими як лейкемія. Вони також корисні для скринінгу лікарських засобів і розробки терапевтичних стратегій, спрямованих на мікрооточення кісткового мозку.

Тканина
Кістковий мозок
Синоніми
  • M210B4

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробластоподібні
Тип клітини
Фібробласт

04Ідентифікатори

Посилання
M2-10B4 (номер за каталогом Cytion 400428)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_5794

05Експресія та сприйнятливість

Продукція
Ламінін, колаген IV (колаген I(-), фактор VIII(-).

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Життєздатність може бути низькою після відтавання.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C57BL/6J x C3H/HeJ
Вік донора
Не визначено