Skip to content
M2-10B4
Tissue
מח עצם
Synonyms
M210B4

Documents

M2-10B4

Cell line · Product number 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים M2-10B4 הוא שיבוט שמקורו בתאי סטרומה של מח עצם מעכבר (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1. תאי סטרומה אלה הם מרכיבים חיוניים בסביבה המיקרוסקופית של מח העצם וממלאים תפקיד משמעותי בתמיכה בהמטופויזיס. תאי M2-10B4 הם בעלי ערך רב במיוחד למחקר המתמקד באינטראקציות בין תאי סטרומה ותאי ייצור דם, שכן הם יכולים לתמוך בייצור מיאלופויזיס אנושי ועכברי בתרבית ארוכת טווח. בנוסף, תאים אלה יכולים לקיים תאי pre-B מסוימים התלויים בתאי סטרומה עכבריים במבחנה, מה שהופך אותם לכלי רב-תכליתי במחקר ייצור הדם.

תאי M2-10B4 מבטאים רכיבים חשובים במטריקס החוץ-תאי, כגון לאמינין וקולגן IV, התורמים ליכולתם לתמוך בתאי הדם. עם זאת, הם אינם מבטאים קולגן I או פקטור VIII, מה שמבדיל אותם משורות תאים סטרומליים אחרים. נוכחותם של לאמינין וקולגן IV חיונית לשמירה על מיקרו-סביבת מח העצם, ומשפיעה על הידבקות התאים, התמיינותם ומסלולי האיתות. חוקרים מרבים להשתמש בקו התאים M2-10B4 במערכות תרבית משותפת כדי לחקור את השפעות תאי הסטרומה על התנהגות תאי אב המטופויטיים, במיוחד בהקשר של פיזיולוגיה של מח העצם ומודלים של מחלות.

בהתחשב במקורם ובתכונותיהם התפקודיות, תאי M2-10B4 מהווים מודל חיוני לחקר נישת מח העצם, במיוחד בהקשר להפרעות המטולוגיות כגון לוקמיה. הם שימושיים גם בסינון תרופות ובפיתוח אסטרטגיות טיפוליות המכוונות לסביבה המיקרו-סביבתית של מח העצם.

Tissue
מח עצם
Synonyms
  • M210B4

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט
Cell type
פיברובלסט

04Identifiers

Citation
M2-10B4 (מספר קטלוגי Cytion 400428)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Expression and susceptibility

Products
למינין, קולגן IV (קולגן I(-), פקטור VIII(-).

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
הכדאיות עשויה להיות נמוכה לאחר ההפשרה.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J x C3H/HeJ
Donor age
לא צוין