M2-10B4

A linhagem celular M2-10B4 é um clone derivado de células estromais da medula óssea de um camundongo (C57BL/6J × C3H/HeJ)F1. Essas células estromais são componentes essenciais do microambiente da medula óssea e desempenham um papel significativo no suporte à hematopoiese. As células M2-10B4 são particularmente valiosas para pesquisas focadas nas interações entre células estromais e hematopoiéticas, pois podem sustentar tanto a mielopoiese humana quanto a murina em cultura de longo prazo. Além disso, essas células podem sustentar in vitro certas linhagens de células pré-B dependentes de células estromais murinas, tornando-as uma ferramenta versátil na pesquisa hematopoiética.

As células M2-10B4 expressam importantes componentes da matriz extracelular, como a laminina e o colágeno IV, que contribuem para sua capacidade de sustentar células hematopoiéticas. No entanto, elas não expressam colágeno I nem fator VIII, o que as distingue de outras linhagens de células estromais. A presença de laminina e colágeno IV é fundamental para a manutenção do microambiente da medula óssea, influenciando a adesão celular, a diferenciação e as vias de sinalização. Os pesquisadores frequentemente utilizam a linhagem celular M2-10B4 em sistemas de cocultura para explorar os efeitos das células estromais no comportamento dos progenitores hematopoiéticos, particularmente no contexto da fisiologia da medula óssea e de modelos de doenças.

Dada sua origem e propriedades funcionais, as células M2-10B4 constituem um modelo essencial para o estudo do nicho da medula óssea, especialmente em relação a doenças hematológicas, como a leucemia. Elas também são úteis na triagem de medicamentos e no desenvolvimento de estratégias terapêuticas direcionadas ao microambiente da medula óssea.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.