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M2-10B4
ティッシュ
骨髄
同義語
M210B4

M2-10B4

Cell line · 製品番号 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

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01概要

説明

M2-10B4細胞株は、(C57BL/6J X C3H/HeJ)F1マウスの骨髄間質細胞由来のクローンである。これらの間質細胞は骨髄微小環境の重要な構成要素であり、造血をサポートする上で重要な役割を果たしている。M2-10B4細胞は、長期培養でヒトとマウスの両方の骨髄造血を支持することができるので、間質細胞と造血細胞の相互作用に焦点を当てた研究には特に価値がある。さらに、これらの細胞はin vitroで特定のマウス間質細胞依存性プレB細胞株を維持することができ、造血研究における多用途のツールとなる。

M2-10B4細胞は、ラミニンやコラーゲンIVのような重要な細胞外マトリックス成分を発現しており、造血細胞を支持する能力に貢献している。しかし、コラーゲンIや第VIII因子は発現しておらず、他の間質細胞株とは異なっている。ラミニンとコラーゲンIVの存在は骨髄微小環境の維持に重要であり、細胞接着、分化、シグナル伝達経路に影響を与える。研究者はしばしばM2-10B4細胞株を共培養系で利用し、特に骨髄生理学や疾患モデルの観点から、造血前駆細胞の挙動に対する間質細胞の影響を調べている。

M2-10B4細胞は、その起源と機能的特性から、骨髄ニッチ、特に白血病のような血液疾患の研究に不可欠なモデルである。また、薬剤スクリーニングや骨髄微小環境を標的とした治療戦略の開発にも有用である。

ティッシュ
骨髄
同義語
  • M210B4

02分類

生物
マウス
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
細胞の種類
線維芽細胞

04識別子

引用
M2-10B4(サイシオン カタログ番号 400428)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_5794

05発現と感受性

製品
ラミニン、コラーゲンIV(コラーゲンI(-)、第VIII因子(-)。

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後の生存率は低いかもしれない。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
C57BL/6J x C3H/HeJ
ドナーの年齢
特定せず