Gå til innholdet
M2-10B4
Vev
Benmarg
Synonymer
M210B4

Dokumenter

M2-10B4

Cell line · Produktnummer 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

M2-10B4-cellelinjen er en klon avledet fra stromaceller i benmargen fra en (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1-mus. Disse stromacellene er viktige komponenter i benmargens mikromiljø og spiller en viktig rolle i hematopoiesen. M2-10B4-cellene er spesielt verdifulle for forskning som fokuserer på samspillet mellom stromaceller og hematopoietiske celler, ettersom de kan støtte både human og murin myelopoiesis i langtidskulturer. I tillegg kan disse cellene opprettholde visse murine stromalcelleavhengige pre-B-cellelinjer in vitro, noe som gjør dem til et allsidig verktøy i hematopoietisk forskning.

M2-10B4-cellene uttrykker viktige ekstracellulære matrikskomponenter som laminin og kollagen IV, noe som bidrar til deres evne til å støtte hematopoietiske celler. De uttrykker imidlertid ikke kollagen I eller faktor VIII, noe som skiller dem fra andre stromale cellelinjer. Tilstedeværelsen av laminin og kollagen IV er avgjørende for opprettholdelsen av benmargens mikromiljø, og påvirker celleadhesjon, differensiering og signalveier. Forskere bruker ofte M2-10B4-cellelinjen i samdyrkingssystemer for å undersøke effekten av stromaceller på atferden til hematopoietiske progenitorer, særlig i forbindelse med benmargsfysiologi og sykdomsmodeller.

M2-10B4-celler er på grunn av sin opprinnelse og sine funksjonelle egenskaper en viktig modell for å studere benmargsnisjen, spesielt i forbindelse med hematologiske lidelser som leukemi. De er også nyttige i screening av legemidler og i utviklingen av terapeutiske strategier rettet mot benmargens mikromiljø.

Vev
Benmarg
Synonymer
  • M210B4

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende
Celletype
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
M2-10B4 (Cytion-katalognummer 400428)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Uttrykk og mottakelighet

Produkter
Laminin, kollagen IV (kollagen I(-), faktor VIII(-).

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Levedyktigheten kan være lav etter tining.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C57BL/6J x C3H/HeJ
Donorens alder
Uspesifisert