Ga naar de inhoud
M2-10B4
Weefsel
Beenmerg
Synoniemen
M210B4

Documenten

M2-10B4

Cell line · Productnummer 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De M2-10B4 cellijn is een kloon afgeleid van beenmergstromale cellen van een (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 muis. Deze stromale cellen zijn essentiële componenten van de beenmergmicro-omgeving en spelen een belangrijke rol in de ondersteuning van hematopoëse. De M2-10B4 cellen zijn bijzonder waardevol voor onderzoek gericht op de interacties tussen stromale en hematopoëtische cellen, omdat ze zowel menselijke als muriene myelopoëse kunnen ondersteunen in langdurige kweek. Bovendien kunnen deze cellen bepaalde muriene stromale cel-afhankelijke pre-B cellijnen in vitro ondersteunen, waardoor ze een veelzijdig hulpmiddel zijn voor hematopoëtisch onderzoek.

De M2-10B4 cellen brengen belangrijke extracellulaire matrixcomponenten zoals laminine en collageen IV tot expressie, wat bijdraagt aan hun vermogen om hematopoëtische cellen te ondersteunen. Ze brengen echter geen collageen I of Factor VIII tot expressie, waardoor ze zich onderscheiden van andere stromale cellijnen. De aanwezigheid van laminine en collageen IV is essentieel voor het behoud van de beenmergmicro-omgeving en beïnvloedt de celadhesie, differentiatie en signaalwegen. Onderzoekers gebruiken de M2-10B4 cellijn vaak in co-cultuur systemen om de effecten van stromale cellen op het gedrag van hematopoietische progenitors te onderzoeken, met name in de context van beenmergfysiologie en ziektemodellen.

Gezien hun oorsprong en functionele eigenschappen zijn M2-10B4 cellen een essentieel model voor het bestuderen van de beenmergniche, vooral in relatie tot hematologische aandoeningen zoals leukemie. Ze zijn ook nuttig bij het screenen van geneesmiddelen en de ontwikkeling van therapeutische strategieën gericht op de beenmerg micro-omgeving.

Weefsel
Beenmerg
Synoniemen
  • M210B4

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Celtype
Fibroblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
M2-10B4 (Cytion catalogusnummer 400428)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Expressie en vatbaarheid

Producten
Laminine, collageen IV (Collageen I(-), Factor VIII(-).

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
De levensvatbaarheid kan laag zijn na ontdooien.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
C57BL/6J x C3H/HeJ
Leeftijd van de donor
Ongespecificeerd