Prejsť na obsah
M2-10B4
Tkanivo
Kostná dreň
Synonymá
M210B4

Dokumenty

M2-10B4

Cell line · Číslo výrobku 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia M2-10B4 je klon odvodený zo stromálnych buniek kostnej drene myší (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1. Tieto stromálne bunky sú základnými zložkami mikroprostredia kostnej drene a zohrávajú významnú úlohu pri podpore krvotvorby. Bunky M2-10B4 sú obzvlášť cenné pre výskum zameraný na interakcie medzi stromálnymi a hematopoetickými bunkami, pretože môžu podporovať ľudskú aj myšiu myelopoézu v dlhodobej kultúre. Okrem toho môžu tieto bunky podporovať určité myšie pre-B bunkové línie závislé od stromálnych buniek in vitro, čo z nich robí univerzálny nástroj v hematopoetickom výskume.

Bunky M2-10B4 exprimujú dôležité zložky extracelulárnej matrix, ako sú laminín a kolagén IV, ktoré prispievajú k ich schopnosti podporovať hematopoetické bunky. Neexprimujú však kolagén I ani faktor VIII, čo ich odlišuje od iných stromálnych bunkových línií. Prítomnosť laminínu a kolagénu IV je rozhodujúca pre udržiavanie mikroprostredia kostnej drene, ovplyvňuje adhéziu buniek, diferenciáciu a signálne dráhy. Výskumníci často využívajú bunkovú líniu M2-10B4 v kokultúrnych systémoch na skúmanie účinkov stromálnych buniek na správanie krvotvorných progenitorov, najmä v kontexte fyziológie kostnej drene a modelov ochorení.

Vzhľadom na svoj pôvod a funkčné vlastnosti sú bunky M2-10B4 základným modelom na štúdium niky kostnej drene, najmä v súvislosti s hematologickými poruchami, ako je leukémia. Sú tiež užitočné pri skríningu liekov a vývoji terapeutických stratégií zameraných na mikroprostredie kostnej drene.

Tkanivo
Kostná dreň
Synonymá
  • M210B4

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Typ bunky
Fibroblasty

04Identifikátory

Citácia
M2-10B4 (katalógové číslo Cytion 400428)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Prejav a náchylnosť

Produkty
Laminín, kolagén IV (kolagén I(-), faktor VIII(-).

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Životaschopnosť môže byť po rozmrazení nízka.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6J x C3H/HeJ
Vek darcu
Nešpecifikované