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M2-10B4
Tissue
骨髓
Synonyms
M210B4

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M2-10B4

Cell line · Product number 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

US$550.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

M2-10B4 細胞系是從 (C57BL/6J × C3H/HeJ)F1 小鼠骨髓基質細胞衍生的克隆。這些基質細胞是骨髓微環境的關鍵組成部分,在支持造血過程中發揮著重要作用。 M2-10B4 細胞對於專注於間質細胞與造血細胞之間相互作用的研究尤具價值,因為它們能在長期培養中同時支持人類和小鼠的髓系造血。 此外,這些細胞還能於體外維持某些依賴小鼠基質細胞的預B細胞系,使其成為造血研究中一種多功能的工具。

M2-10B4 細胞表達重要的細胞外基質成分,例如層粘連蛋白和 IV 型膠原蛋白,這些成分有助於其支持造血細胞的能力。然而,它們不表達 I 型膠原蛋白或第八因子,這使它們有別於其他基質細胞系。 層粘連蛋白和 IV 型膠原蛋白的存在對於維持骨髓微環境至關重要,會影響細胞黏附、分化及訊號傳導路徑。 研究人員常將 M2-10B4 細胞系應用於共培養系統中,以探究基質細胞對造血前體細胞行為的影響,特別是在骨髓生理學及疾病模型的背景下。

鑒於其來源與功能特性,M2-10B4 細胞是研究骨髓微環境的重要模型,特別是在與白血病等血液系統疾病相關的研究中。此外,該細胞系對於藥物篩選以及針對骨髓微環境的治療策略開發亦具實用價值。

Tissue
骨髓
Synonyms
  • M210B4

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
成纖維細胞樣
Cell type
成纖維細胞

04Identifiers

Citation
M2-10B4(Cytion 型號 400428)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Expression and susceptibility

Products
層黏連蛋白、IV型膠原蛋白(I型膠原蛋白(-)、第八因子(-))。

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
1 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解凍後,細胞存活率可能較低。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J × C3H/HeJ
Donor age
未指定