Langsung ke isi
M2-10B4
Tisu
Sumsum tulang
Sinonim
M210B4

M2-10B4

Cell line · Nomor produk 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel M2-10B4 adalah klon yang berasal dari sel stroma sumsum tulang dari tikus (C57BL/6J X C3H/HeJ) F1. Sel-sel stroma ini adalah komponen penting dari lingkungan mikro sumsum tulang dan memainkan peran penting dalam mendukung hematopoiesis. Sel M2-10B4 sangat berharga untuk penelitian yang berfokus pada interaksi antara sel stroma dan hematopoietik, karena dapat mendukung mielopoiesis manusia dan tikus dalam kultur jangka panjang. Selain itu, sel-sel ini dapat mempertahankan garis sel pre-B yang bergantung pada sel stroma murin tertentu secara in vitro, menjadikannya alat serbaguna dalam penelitian hematopoietik.

Sel M2-10B4 mengekspresikan komponen matriks ekstraseluler penting seperti laminin dan kolagen IV, yang berkontribusi pada kemampuan mereka untuk mendukung sel hematopoietik. Namun, mereka tidak mengekspresikan kolagen I atau Faktor VIII, yang membedakan mereka dari garis sel stroma lainnya. Kehadiran laminin dan kolagen IV sangat penting untuk pemeliharaan lingkungan mikro sumsum tulang, yang memengaruhi adhesi sel, diferensiasi, dan jalur pensinyalan. Para peneliti sering menggunakan garis sel M2-10B4 dalam sistem ko-kultur untuk mengeksplorasi efek sel stroma pada perilaku nenek moyang hematopoietik, terutama dalam konteks fisiologi sumsum tulang dan model penyakit.

Mengingat asal-usul dan sifat fungsionalnya, sel M2-10B4 merupakan model penting untuk mempelajari ceruk sumsum tulang, terutama dalam kaitannya dengan gangguan hematologi seperti leukemia. Sel ini juga berguna dalam skrining obat dan pengembangan strategi terapeutik yang menargetkan lingkungan mikro sumsum tulang.

Tisu
Sumsum tulang
Sinonim
  • M210B4

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti fibroblast
Jenis sel
Fibroblast

04Pengidentifikasi

Referensi
M2-10B4 (Nomor katalog Cytion 400428)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Ekspresi dan kerentanan

Produk
Laminin, kolagen IV (Kolagen I (-), Faktor VIII (-).

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Viabilitas mungkin rendah setelah pencairan.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
C57BL / 6J x C3H / HeJ
Usia donor
Tidak ditentukan