M2-10B4
Cell line · Številka izdelka 400428
The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...
Prilagajanje / Priporočila
- M2-10B4Cell line€550.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija M2-10B4 je klon, pridobljen iz stromalnih celic kostnega mozga miši (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1. Te stromalne celice so bistvene sestavine mikrookolja kostnega mozga in imajo pomembno vlogo pri podpiranju hematopoeze. Celice M2-10B4 so še posebej dragocene za raziskave, osredotočene na interakcije med stromalnimi in hematopoetskimi celicami, saj lahko v dolgotrajni kulturi podpirajo tako človeško kot mišjo mielopoezo. Poleg tega lahko te celice in vitro vzdržujejo nekatere linije celic pre-B, ki so odvisne od mišjih stromalnih celic, zaradi česar so vsestransko orodje za raziskave krvotvorbe.
Celice M2-10B4 izražajo pomembne sestavine zunajceličnega matriksa, kot sta laminin in kolagen IV, ki prispevajo k njihovi sposobnosti podpiranja krvotvornih celic. Vendar ne izražajo kolagena I ali faktorja VIII, kar jih razlikuje od drugih stromalnih celičnih linij. Prisotnost laminina in kolagena IV je ključnega pomena za vzdrževanje mikrookolja kostnega mozga, saj vpliva na adhezijo, diferenciacijo in signalne poti celic. Raziskovalci pogosto uporabljajo celično linijo M2-10B4 v sistemih ko-kulture za raziskovanje učinkov stromalnih celic na obnašanje krvotvornih progenitorjev, zlasti v okviru fiziologije kostnega mozga in modelov bolezni.
Zaradi svojega izvora in funkcionalnih lastnosti so celice M2-10B4 bistven model za preučevanje niše kostnega mozga, zlasti v povezavi s hematološkimi boleznimi, kot je levkemija. Uporabne so tudi pri preverjanju zdravil in razvoju terapevtskih strategij, usmerjenih v mikrookolje kostnega mozga.
- Tkivo
- Kostni mozeg
- Sinonimi
- M210B4
02Razvrstitev
- Organizem
- Miška
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Fibroblastom podobni
- Vrsta celice
- Fibroblast
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- M2-10B4 (kataloška številka Cytion 400428)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5794
05Izražanje in dovzetnost
- Izdelki
- Laminin, kolagen IV (kolagen I(-), faktor VIII(-).
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Gostota setve
- 1 x 104 celic/cm2
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrznitvi je vitalnost lahko nizka.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Pasma / podvrsta
- C57BL/6J x C3H/HeJ
- Starost darovalca
- Neopredeljeno
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Izjava o omejitvi odgovornosti
- Naše celice so na voljo izključno za laboratorijske raziskave in vitro in niso namenjene za klinično ali diagnostično uporabo, niti jih ni dovoljeno dajati ljudem ali uporabljati v veterinarske namene. Uporabniki morajo upoštevati vse veljavne smernice in predpise za ravnanje in uporabo teh celic v raziskovalnem okolju.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da