M2-10B4

La línea celular M2-10B4 es un clon derivado de células estromales de la médula ósea de un ratón (C57BL/6J × C3H/HeJ)F1. Estas células estromales son componentes esenciales del microambiente de la médula ósea y desempeñan un papel significativo en el apoyo a la hematopoyesis. Las células M2-10B4 son particularmente valiosas para la investigación centrada en las interacciones entre las células estromales y las hematopoyéticas, ya que pueden sustentar tanto la mielopoyesis humana como la murina en cultivos a largo plazo. Además, estas células pueden mantener in vitro ciertas líneas celulares de pre-B dependientes de células estromales murinas, lo que las convierte en una herramienta versátil para la investigación hematopoyética.

Las células M2-10B4 expresan componentes importantes de la matriz extracelular, como la laminina y el colágeno IV, lo cual contribuye a su capacidad para sustentar a las células hematopoyéticas. Sin embargo, no expresan colágeno I ni el factor VIII, lo que las distingue de otras líneas celulares estromales. La presencia de laminina y colágeno IV es fundamental para el mantenimiento del microambiente de la médula ósea, ya que influye en la adhesión celular, la diferenciación y las vías de señalización. Los investigadores suelen utilizar la línea celular M2-10B4 en sistemas de cocultivo para explorar los efectos de las células estromales en el comportamiento de los progenitores hematopoyéticos, particularmente en el contexto de la fisiología de la médula ósea y los modelos de enfermedad.

Dado su origen y sus propiedades funcionales, las células M2-10B4 constituyen un modelo esencial para estudiar el nicho de la médula ósea, especialmente en relación con trastornos hematológicos como la leucemia. También son útiles en el cribado de fármacos y el desarrollo de estrategias terapéuticas dirigidas al microambiente de la médula ósea.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.