İçeriğe atla
M2-10B4
Doku
Kemik iliği
Eş anlamlılar
M210B4

M2-10B4

Cell line · Ürün numarası 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

M2-10B4 hücre hattı, (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 faresinden elde edilen kemik iliği stromal hücrelerinden türetilen bir klondur. Bu stromal hücreler kemik iliği mikroçevresinin temel bileşenleridir ve hematopoezin desteklenmesinde önemli bir rol oynarlar. M2-10B4 hücreleri, uzun süreli kültürde hem insan hem de murin miyelopoezini destekleyebildikleri için stromal ve hematopoetik hücreler arasındaki etkileşimlere odaklanan araştırmalar için özellikle değerlidir. Ek olarak, bu hücreler bazı murin stromal hücre bağımlı pre-B hücre hatlarını in vitro olarak sürdürebilir ve bu da onları hematopoetik araştırmalarda çok yönlü bir araç haline getirir.

M2-10B4 hücreleri laminin ve kolajen IV gibi önemli hücre dışı matris bileşenlerini ifade eder ve bu da hematopoetik hücreleri destekleme kabiliyetlerine katkıda bulunur. Bununla birlikte, kolajen I veya Faktör VIII ifade etmezler, bu da onları diğer stromal hücre hatlarından ayırır. Laminin ve kolajen IV'ün varlığı, hücre yapışmasını, farklılaşmasını ve sinyal yollarını etkileyerek kemik iliği mikro çevresinin korunması için kritik öneme sahiptir. Araştırmacılar, özellikle kemik iliği fizyolojisi ve hastalık modelleri bağlamında, stromal hücrelerin hematopoetik progenitörlerin davranışı üzerindeki etkilerini araştırmak için ortak kültür sistemlerinde sıklıkla M2-10B4 hücre hattını kullanmaktadır.

Kökenleri ve işlevsel özellikleri göz önüne alındığında, M2-10B4 hücreleri, özellikle lösemi gibi hematolojik bozukluklarla ilişkili olarak kemik iliği nişini incelemek için önemli bir modeldir. Ayrıca ilaç taramasında ve kemik iliği mikroçevresini hedef alan terapötik stratejilerin geliştirilmesinde de faydalıdırlar.

Doku
Kemik iliği
Eş anlamlılar
  • M210B4

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Hücre türü
Fibroblast

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
M2-10B4 (Cytion katalog numarası 400428)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05İfade ve duyarlılık

Ürünler
Laminin, kolajen IV (Kolajen I(-), Faktör VIII(-).

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra canlılık düşük olabilir.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
C57BL/6J x C3H/HeJ
Bağışçının yaşı
Belirtilmemiş