Přejít na obsah
M2-10B4
Tkáň
Kostní dřeň
Synonyma
M210B4

Dokumenty

M2-10B4

Cell line · Číslo výrobku 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie M2-10B4 je klon odvozený ze stromálních buněk kostní dřeně myši (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1. Tyto stromální buňky jsou základními složkami mikroprostředí kostní dřeně a hrají významnou roli v podpoře krvetvorby. Buňky M2-10B4 jsou zvláště cenné pro výzkum zaměřený na interakce mezi stromálními a hematopoetickými buňkami, protože mohou podporovat lidskou i myší myelopoézu v dlouhodobé kultuře. Kromě toho mohou tyto buňky udržovat určité linie pre-B buněk závislé na myších stromálních buňkách in vitro, což z nich činí univerzální nástroj pro výzkum krvetvorby.

Buňky M2-10B4 exprimují důležité složky extracelulární matrix, jako je laminin a kolagen IV, které přispívají k jejich schopnosti podporovat hematopoetické buňky. Neexprimují však kolagen I ani faktor VIII, což je odlišuje od jiných linií stromálních buněk. Přítomnost lamininu a kolagenu IV je rozhodující pro udržení mikroprostředí kostní dřeně, ovlivňuje adhezi buněk, jejich diferenciaci a signální dráhy. Výzkumníci často využívají buněčnou linii M2-10B4 v kokultivačních systémech ke zkoumání vlivu stromálních buněk na chování hematopoetických progenitorů, zejména v kontextu fyziologie kostní dřeně a modelů onemocnění.

Vzhledem ke svému původu a funkčním vlastnostem jsou buňky M2-10B4 základním modelem pro studium niky kostní dřeně, zejména ve vztahu k hematologickým onemocněním, jako je leukémie. Jsou také užitečné při screeningu léčiv a vývoji terapeutických strategií zaměřených na mikroprostředí kostní dřeně.

Tkáň
Kostní dřeň
Synonyma
  • M210B4

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Fibroblasty

04Identifikátory

Citace
M2-10B4 (katalogové číslo Cytion 400428)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Exprese a náchylnost

Produkty
Laminin, kolagen IV (kolagen I(-), faktor VIII(-).

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Životaschopnost může být po rozmrazení nízká.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C57BL/6J x C3H/HeJ
Věk dárce
Nespecifikováno