M2-10B4
Cell line · Preces numurs 400428
The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...
Pielāgošana / Ieteikumi
- M2-10B4Cell line€550.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
M2-10B4 šūnu līnija ir klons, kas iegūts no kaulu smadzeņu stromālajām šūnām, kuras iegūtas no (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 peles. Šīs stromālās šūnas ir būtiskas kaulu smadzeņu mikrovides sastāvdaļas, un tām ir nozīmīga loma hematopoēzes atbalstā. M2-10B4 šūnas ir īpaši vērtīgas pētījumiem, kas vērsti uz stromālo un hematopoētisko šūnu mijiedarbību, jo tās var atbalstīt gan cilvēka, gan peļu mielopoēzi ilgtermiņa kultūrā. Turklāt šīs šūnas var in vitro uzturēt noteiktas no peļu stromālajām šūnām atkarīgas pre-B šūnu līnijas, padarot tās par daudzpusīgu instrumentu hematopoētiskajos pētījumos.
M2-10B4 šūnas ekspresē svarīgus āršūnu matriksa komponentus, piemēram, lamīnu un kolagēnu IV, kas veicina to spēju atbalstīt hematopoētiskās šūnas. Tomēr tās neekspresē kolagēnu I vai VIII faktoru, kas tās atšķir no citām stromālo šūnu līnijām. Laminīna un kolagēna IV klātbūtne ir būtiska kaulu smadzeņu mikrovides uzturēšanai, ietekmējot šūnu adhēziju, diferenciāciju un signalizācijas ceļus. Pētnieki bieži izmanto M2-10B4 šūnu līniju kopkultūru sistēmās, lai pētītu stromālo šūnu ietekmi uz hematopoētisko progenitoru uzvedību, jo īpaši saistībā ar kaulu smadzeņu fizioloģiju un slimību modeļiem.
Ņemot vērā M2-10B4 šūnu izcelsmi un funkcionālās īpašības, tās ir būtisks modelis kaulu smadzeņu nišas izpētei, jo īpaši saistībā ar tādām hematoloģiskām slimībām kā leikēmija. Tās ir noderīgas arī zāļu skrīningam un tādu terapeitisko stratēģiju izstrādei, kas vērstas uz kaulu smadzeņu mikrovidi.
- Audums
- Kaulu smadzenes
- Sinonīmi
- M210B4
02Klasifikācija
- Organisms
- Pele
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Fibroblastiem līdzīgs
- Šūnu tips
- Fibroblasti
04Identifikatori
- Atsauce
- M2-10B4 (Cytion kataloga numurs 400428)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5794
05Pazīmes un uzņēmība
- Produkti
- Laminīns, kolagēns IV (kolagēns I(-), faktors VIII(-).
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 x 104 šūnas/cm2
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas dzīvotspēja var būt zema.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Šķirne / pasuga
- C57BL/6J x C3H/HeJ
- Donora vecums
- Nav norādīts
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Atbrīvojums no atbildības
- Mūsu šūnas ir paredzētas tikai in vitro laboratorijas pētījumiem, un tās nav paredzētas klīniskai vai diagnostiskai lietošanai, tās nav ievadāmas cilvēkiem vai izmantojamas veterinārijā. Lietotājiem jāievēro visas piemērojamās vadlīnijas un noteikumi par šo šūnu apstrādi un izmantošanu pētniecībā.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
