Pāriet uz saturu
M2-10B4
Audums
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
M210B4

Dokumenti

M2-10B4

Cell line · Preces numurs 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

M2-10B4 šūnu līnija ir klons, kas iegūts no kaulu smadzeņu stromālajām šūnām, kuras iegūtas no (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 peles. Šīs stromālās šūnas ir būtiskas kaulu smadzeņu mikrovides sastāvdaļas, un tām ir nozīmīga loma hematopoēzes atbalstā. M2-10B4 šūnas ir īpaši vērtīgas pētījumiem, kas vērsti uz stromālo un hematopoētisko šūnu mijiedarbību, jo tās var atbalstīt gan cilvēka, gan peļu mielopoēzi ilgtermiņa kultūrā. Turklāt šīs šūnas var in vitro uzturēt noteiktas no peļu stromālajām šūnām atkarīgas pre-B šūnu līnijas, padarot tās par daudzpusīgu instrumentu hematopoētiskajos pētījumos.

M2-10B4 šūnas ekspresē svarīgus āršūnu matriksa komponentus, piemēram, lamīnu un kolagēnu IV, kas veicina to spēju atbalstīt hematopoētiskās šūnas. Tomēr tās neekspresē kolagēnu I vai VIII faktoru, kas tās atšķir no citām stromālo šūnu līnijām. Laminīna un kolagēna IV klātbūtne ir būtiska kaulu smadzeņu mikrovides uzturēšanai, ietekmējot šūnu adhēziju, diferenciāciju un signalizācijas ceļus. Pētnieki bieži izmanto M2-10B4 šūnu līniju kopkultūru sistēmās, lai pētītu stromālo šūnu ietekmi uz hematopoētisko progenitoru uzvedību, jo īpaši saistībā ar kaulu smadzeņu fizioloģiju un slimību modeļiem.

Ņemot vērā M2-10B4 šūnu izcelsmi un funkcionālās īpašības, tās ir būtisks modelis kaulu smadzeņu nišas izpētei, jo īpaši saistībā ar tādām hematoloģiskām slimībām kā leikēmija. Tās ir noderīgas arī zāļu skrīningam un tādu terapeitisko stratēģiju izstrādei, kas vērstas uz kaulu smadzeņu mikrovidi.

Audums
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
  • M210B4

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
M2-10B4 (Cytion kataloga numurs 400428)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Pazīmes un uzņēmība

Produkti
Laminīns, kolagēns IV (kolagēns I(-), faktors VIII(-).

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas dzīvotspēja var būt zema.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6J x C3H/HeJ
Donora vecums
Nav norādīts