Skip to content
M2-10B4
Tissue
ไขกระดูก
Synonyms
M210B4

Documents

M2-10B4

Cell line · Product number 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ M2-10B4 เป็นโคลนที่ได้มาจากเซลล์สโตรมาของไขกระดูกจากหนู (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 เซลล์สโตรมาเหล่านี้เป็นองค์ประกอบสำคัญของจุลภาคในไขกระดูกและมีบทบาทสำคัญในการสนับสนุนการสร้างเม็ดเลือดเซลล์ M2-10B4 มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยที่มุ่งเน้นการปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์สโตรมาและเซลล์เม็ดเลือด เนื่องจากสามารถสนับสนุนการสร้างเม็ดเลือดทั้งในมนุษย์และหนูในระยะยาว นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังสามารถเลี้ยงเซลล์พรี-บีบางสายพันธุ์ที่พึ่งพาเซลล์สโตรมาของหนูในหลอดทดลองได้ ทำให้เป็นเครื่องมืออเนกประสงค์ในการวิจัยด้านระบบสร้างเม็ดเลือด

เซลล์ M2-10B4 แสดงออกขององค์ประกอบสำคัญในเมทริกซ์นอกเซลล์ เช่น ลามินินและคอลลาเจนชนิดที่ 4 ซึ่งมีส่วนช่วยในความสามารถในการรองรับเซลล์เม็ดเลือด อย่างไรก็ตาม เซลล์เหล่านี้ไม่แสดงออกของคอลลาเจนชนิดที่ 1 หรือแฟคเตอร์ VIII ซึ่งทำให้แตกต่างจากสายพันธุ์เซลล์สโตรมาอื่นๆ การมีอยู่ของลามินินและคอลลาเจนชนิดที่ 4 มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการคงสภาพของจุลสภาพแวดล้อมในไขกระดูก โดยมีอิทธิพลต่อการยึดเกาะของเซลล์ การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ และเส้นทางการส่งสัญญาณนักวิจัยมักใช้สายเซลล์ M2-10B4 ในระบบเพาะเลี้ยงร่วมเพื่อศึกษาผลกระทบของเซลล์สโตรมาต่อพฤติกรรมของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด โดยเฉพาะในบริบทของสรีรวิทยาของไขกระดูกและแบบจำลองโรค

เนื่องจากต้นกำเนิดและคุณสมบัติเชิงหน้าที่ เซลล์ M2-10B4 จึงเป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาช่องว่างของไขกระดูก โดยเฉพาะอย่างยิ่งในความสัมพันธ์กับความผิดปกติทางโลหิตวิทยา เช่น มะเร็งเม็ดเลือดขาว นอกจากนี้ยังมีประโยชน์ในการคัดกรองยาและการพัฒนากลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าไปที่สภาพแวดล้อมจุลภาคของไขกระดูก

Tissue
ไขกระดูก
Synonyms
  • M210B4

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
M2-10B4 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400428)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Expression and susceptibility

Products
ลามินิน, คอลลาเจนชนิดที่ 4 (คอลลาเจนชนิดที่ 1 (-) ปัจจัยที่ 8 (-)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
ความสามารถในการเจริญเติบโตอาจต่ำหลังการละลาย
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J x C3H/HeJ
Donor age
ไม่ระบุ