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M2-10B4
Pañuelo de papel
Médula ósea
Sinónimos
M210B4

Documentos

M2-10B4

Cell line · Número de producto 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

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Personalización / Recomendaciones

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Lote
Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción

La línea celular M2-10B4 es un clon derivado de células estromales de médula ósea de un ratón (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1. Estas células estromales son componentes esenciales del microambiente de la médula ósea y desempeñan un papel importante en el soporte de la hematopoyesis. Las células M2-10B4 son especialmente valiosas para la investigación centrada en las interacciones entre células estromales y hematopoyéticas, ya que pueden sostener la mielopoyesis humana y murina en cultivos a largo plazo. Además, estas células pueden sostener in vitro determinadas líneas de células pre-B dependientes de células estromales murinas, lo que las convierte en una herramienta versátil en la investigación hematopoyética.

Las células M2-10B4 expresan importantes componentes de la matriz extracelular, como laminina y colágeno IV, que contribuyen a su capacidad para sostener células hematopoyéticas. Sin embargo, no expresan colágeno I ni Factor VIII, lo que las distingue de otras líneas celulares estromales. La presencia de laminina y colágeno IV es fundamental para el mantenimiento del microentorno de la médula ósea, ya que influye en la adhesión celular, la diferenciación y las vías de señalización. Los investigadores utilizan a menudo la línea celular M2-10B4 en sistemas de co-cultivo para explorar los efectos de las células estromales en el comportamiento de los progenitores hematopoyéticos, particularmente en el contexto de la fisiología de la médula ósea y los modelos de enfermedad.

Dado su origen y propiedades funcionales, las células M2-10B4 son un modelo esencial para estudiar el nicho de la médula ósea, especialmente en relación con trastornos hematológicos como la leucemia. También son útiles para el cribado de fármacos y el desarrollo de estrategias terapéuticas dirigidas al microambiente de la médula ósea.

Pañuelo de papel
Médula ósea
Sinónimos
  • M210B4

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Fibroblastos

04Identificadores

Referencia
M2-10B4 (número de catálogo de Cytion 400428)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Expresión y susceptibilidad

Productos
Laminina, colágeno IV (Colágeno I(-), Factor VIII(-).

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
La viabilidad puede ser baja tras la descongelación.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C57BL/6J x C3H/HeJ
Edad del donante
Sin especificar