Mine otse sisu juurde
M2-10B4
Kude
Luuüdi
Sünonüümid
M210B4

Dokumendid

M2-10B4

Cell line · Toote number 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

M2-10B4 rakuliin on kloon, mis on saadud (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 hiire luuüdi stroomarakkudest. Need stroomirakud on luuüdi mikrokeskkonna olulised komponendid ja mängivad olulist rolli vereloome toetamisel. M2-10B4 rakud on eriti väärtuslikud stroomi- ja vereloome rakkude vastastikmõju uurimiseks, kuna need võivad pikaajalises kultuuris toetada nii inimese kui ka hiire müelopoeesi. Lisaks sellele suudavad need rakud säilitada in vitro teatavaid hiire stroomirakkudest sõltuvaid pre-B rakuliine, mis muudab need mitmekülgseks vahendiks hematopoeetilistes uuringutes.

M2-10B4 rakud ekspresseerivad olulisi rakuvälise maatriksi komponente, nagu laminiin ja kollageen IV, mis aitavad kaasa nende võimele toetada vereloome rakke. Siiski ei ekspresseeri nad kollageen I või VIII faktorit, mis eristab neid teistest stroomi rakuliinidest. Laminiini ja kollageen IV olemasolu on luuüdi mikrokeskkonna säilitamiseks kriitilise tähtsusega, mõjutades rakkude adhesiivsust, diferentseerumist ja signaaliradu. Teadlased kasutavad M2-10B4 rakuliini sageli ko-kultuurisüsteemides, et uurida stroomirakkude mõju vereloome eellaste käitumisele, eriti luuüdi füsioloogia ja haiguste mudelite kontekstis.

Arvestades nende päritolu ja funktsionaalseid omadusi, on M2-10B4 rakud oluline mudel luuüdi niši uurimiseks, eriti seoses hematoloogiliste haigustega, nagu näiteks leukeemia. Nad on kasulikud ka ravimite sõelumisel ja luuüdi mikrokeskkonnale suunatud ravistrateegiate väljatöötamisel.

Kude
Luuüdi
Sünonüümid
  • M210B4

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
M2-10B4 (Cytioni katalooginumber 400428)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Laminiin, kollageen IV (kollageen I(-), VIII(-) faktor.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist võib elujõulisus olla madal.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6J x C3H/HeJ
Doonori vanus
Täpsustamata