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M2-10B4
Tissue
Moelle osseuse
Synonyms
M210B4

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M2-10B4

Cell line · Product number 400428

The M2-10B4 cell line is a clone derived from bone marrow stromal cells from a (C57BL/6J X C3H/HeJ)F1 mouse. These stromal cells are essential components ...

US$550.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire M2-10B4 est un clone dérivé de cellules stromales de la moelle osseuse d’une souris (C57BL/6J × C3H/HeJ)F1. Ces cellules stromales constituent des composants essentiels du microenvironnement de la moelle osseuse et jouent un rôle important dans le soutien de l’hématopoïèse. Les cellules M2-10B4 sont particulièrement utiles pour la recherche axée sur les interactions entre les cellules stromales et hématopoïétiques, car elles peuvent soutenir la myélopoïèse humaine et murine en culture à long terme. De plus, ces cellules peuvent maintenir in vitro certaines lignées de cellules pré-B murines dépendantes des cellules stromales, ce qui en fait un outil polyvalent pour la recherche en hématopoïèse.

Les cellules M2-10B4 expriment d’importants composants de la matrice extracellulaire, tels que la laminine et le collagène IV, qui contribuent à leur capacité à soutenir les cellules hématopoïétiques. Cependant, elles n’expriment ni le collagène I ni le facteur VIII, ce qui les distingue des autres lignées de cellules stromales. La présence de laminine et de collagène IV est essentielle au maintien du microenvironnement de la moelle osseuse, influençant l’adhésion cellulaire, la différenciation et les voies de signalisation. Les chercheurs utilisent souvent la lignée cellulaire M2-10B4 dans des systèmes de co-culture pour étudier les effets des cellules stromales sur le comportement des progéniteurs hématopoïétiques, en particulier dans le contexte de la physiologie de la moelle osseuse et des modèles de maladies.

Compte tenu de leur origine et de leurs propriétés fonctionnelles, les cellules M2-10B4 constituent un modèle essentiel pour l’étude de la niche médullaire, notamment en ce qui concerne les troubles hématologiques tels que la leucémie. Elles sont également utiles pour le criblage de médicaments et l’élaboration de stratégies thérapeutiques ciblant le microenvironnement de la moelle osseuse.

Tissue
Moelle osseuse
Synonyms
  • M210B4

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type fibroblaste
Cell type
Fibroblaste

04Identifiers

Citation
M2-10B4 (numéro de catalogue Cytion 400428)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5794

05Expression and susceptibility

Products
Laminine, collagène IV (collagène I (-), facteur VIII (-).

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
1 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
La viabilité pourrait être faible après la décongélation.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J × C3H/HeJ
Donor age
Non précisé