GP2D

GP2d est une lignée cellulaire d’adénocarcinome colorectal humain dérivée d’une tumeur du côlon peu différenciée. Elle a été établie parallèlement à une lignée sœur, GPSd, à partir du même échantillon d’adénocarcinome. Bien que les deux lignées partagent des altérations génétiques similaires, conformes aux profils couramment observés dans le cancer colorectal, notamment une duplication inversée touchant le chromosome 10q11-q21, elles diffèrent nettement par leurs caractéristiques phénotypiques et leur comportement cellulaire. Il est à noter qu’aucune translocation impliquant le proto-oncogène ret — cartographié dans cette région chromosomique — n’a été détectée par analyse par Southern blot, ce qui suggère que la duplication n’a pas perturbé ce gène directement.

Les cellules GP2d présentent un mode de croissance cohésif et étalé à partir des bords des microcolonies pour former une monocouche épithéliale confluente. Cette morphologie s’accompagne de profils d’expression distincts de molécules d’adhésion telles que l’intégrine α2, la desmoplakine et la E-cadhérine, qui jouent toutes un rôle dans le maintien de l’intégrité épithéliale. Sur le plan fonctionnel, les cellules GP2d réagissent fortement au facteur de croissance épidermique (EGF), au facteur de croissance transformant alpha (TGFα) et à l’insuline, comme le démontre l’augmentation de la prolifération cellulaire en réponse à ces ligands. Il est intéressant de noter que les cellules GP2d et GPSd expriment toutes deux un nombre comparable de récepteurs de l’EGF, mais diffèrent dans leur expression des ligands de ces récepteurs. Les cellules GP2d possèdent une quantité abondante d’ARNm de l’amphiréguline, tandis que les cellules GPSd expriment principalement l’ARNm du TGFα avec peu ou pas d’amphiréguline, ce qui correspond aux réponses biologiques différentes observées.

Ces caractéristiques font de la lignée GP2d un modèle précieux pour l’étude de la régulation de la signalisation des facteurs de croissance et de l’adhésion cellulaire dans le cancer colorectal. Sa réactivité aux stimuli de la voie de l’EGF et sa morphologie épithéliale distincte soulignent son utilité dans l’étude de la différenciation et de la prolifération des cellules tumorales. De plus, son origine commune avec les cellules GPSd permet de mener des études comparatives sur la variation clonale au sein des tumeurs, notamment dans le contexte de la dynamique ligand-récepteur et des réponses liées à la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM).

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.