GP2D

GP2d е клетъчна линия от човешки колоректален аденокарцином, получена от слабодиференцирана туморна тъкан на дебелото черво. Тя е създадена успоредно с родствената линия GPSd от същия образец на аденокарцином. Въпреки че и двете линии споделят сходни генетични промени, съответстващи на често срещаните модели при колоректалния рак, включително инвертирано дублиране, засягащо хромозома 10q11-q21, те се различават значително по своите фенотипни характеристики и клетъчно поведение. Забележително е, че при Southern blot анализ не бяха открити транслокации, включващи протоонкогена ret, картиран в тази хромозомна област, което предполага, че дупликацията не е нарушила директно този ген.

Клетките GP2d проявяват кохезивен, разпространяващ се модел на растеж от краищата на микроколониите, за да образуват конфлуентен епителиален монослой. Тази морфология е придружена от отличителни модели на експресия на адхезионни молекули като α2-интегрин, десмоплакин и Е-кадхерин, всички от които играят роля в поддържането на епителиалната цялост. Функционално GP2d клетките реагират силно на епидермалния растежен фактор (EGF), трансформиращия растежен фактор-алфа (TGFα) и инсулина, както се демонстрира от повишената клетъчна пролиферация в отговор на тези лиганди. Интересно е, че както GP2d, така и GPSd експресират сравними количества EGF рецептори, но се различават в експресията на лигандите на EGF рецепторите. GP2d клетките имат изобилие от амфирегулин мРНК, докато GPSd преобладаващо експресира TGFα мРНК с малко или никакъв амфирегулин, което корелира с наблюдаваните различаващи се биологични реакции.

Тези характеристики правят GP2d ценен модел за изучаване на регулацията на сигнализирането на растежните фактори и клетъчната адхезия при колоректалния рак. Неговата реактивност към стимулите на EGF пътя и отличителната епителна морфология подчертават неговата полезност при изследване на диференциацията и пролиферацията на туморните клетки. Освен това, общият произход с GPSd позволява сравнителни проучвания на клоналната вариация в рамките на туморите, особено в контекста на динамиката на лиганд-рецепторните взаимодействия и реакциите на епително-мезенхимния преход (EMT).

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация