GP2D

GP2d je ľudská bunková línia kolorektálneho adenokarcinómu odvodená z nízko diferencovaného nádoru hrubého čreva. Bola vytvorená spolu so sesterskou líniou GPSd z rovnakého vzorku adenokarcinómu. Hoci obe línie vykazujú podobné genetické zmeny zodpovedajúce bežným vzorom pozorovaným pri kolorektálnom karcinóme, vrátane invertovanej duplikácie zahŕňajúcej chromozóm 10q11-q21, výrazne sa líšia vo svojich fenotypových charakteristikách a bunkovom správaní. Je pozoruhodné, že analýzou Southern blot neboli zistené žiadne translokácie zahŕňajúce protoonkogén ret – mapovaný do tejto chromozómovej oblasti –, čo naznačuje, že duplikácia tento gén priamo nenarušila.

Bunky GP2d vykazujú súdržný, rozširujúci sa rastový vzor od okrajov mikrokolónií, čím vytvárajú konfluentnú epiteliálnu monovrstvu. Táto morfológia je sprevádzaná odlišnými expresnými vzormi adhéznych molekúl, ako sú α2-integrín, desmoplakín a E-kadherín, z ktorých všetky hrajú úlohu v udržiavaní epiteliálnej integrity. Z funkčného hľadiska bunky GP2d silne reagujú na epidermálny rastový faktor (EGF), transformujúci rastový faktor alfa (TGFα) a inzulín, čo dokazuje zvýšená bunková proliferácia v reakcii na tieto ligandy. Zaujímavé je, že bunky GP2d aj GPSd exprimujú porovnateľný počet receptorov EGF, ale líšia sa v expresii ligandov receptora EGF. Bunky GP2d majú hojné množstvo mRNA amfiregulínu, zatiaľ čo GPSd prevažne exprimuje mRNA TGFα s malým alebo žiadnym množstvom amfiregulínu, čo koreluje s pozorovanými odlišnými biologickými reakciami.

Tieto vlastnosti robia z GP2d cenný model na štúdium regulácie signalizácie rastových faktorov a bunkovej adhézie pri kolorektálnom karcinóme. Jeho citlivosť na stimuly EGF dráhy a odlišná morfológia epitelu zdôrazňujú jeho užitočnosť pri skúmaní diferenciácie a proliferácie nádorových buniek. Okrem toho spoločný pôvod s GPSd umožňuje komparatívne štúdie klonálnej variácie v rámci nádorov, najmä v kontexte dynamiky ligand-receptor a reakcií epitelovo-mezenchymálnej transformácie (EMT).

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke