GP2D

GP2d è una linea cellulare di adenocarcinoma colorettale umano derivata da un tumore del colon scarsamente differenziato. È stata ottenuta insieme a una linea gemella, GPSd, dallo stesso campione di adenocarcinoma. Sebbene entrambe le linee presentino alterazioni genetiche simili, coerenti con i modelli comunemente osservati nel cancro colorettale, tra cui una duplicazione invertita che coinvolge il cromosoma 10q11-q21, esse differiscono notevolmente per le loro caratteristiche fenotipiche e il comportamento cellulare. In particolare, nessuna traslocazione che coinvolga il proto-oncogene ret - mappato in questa regione cromosomica - è stata rilevata dall'analisi Southern blot, suggerendo che la duplicazione non abbia alterato direttamente questo gene.

Le cellule GP2d mostrano un modello di crescita coeso e a diffusione dai bordi delle microcolonie per formare un monostrato epiteliale confluente. Questa morfologia è accompagnata da modelli di espressione distinti di molecole di adesione quali l'integrina α2, la desmoplakina e l'E-caderina, che svolgono tutte un ruolo nel mantenimento dell'integrità epiteliale. Dal punto di vista funzionale, le cellule GP2d rispondono in modo robusto al fattore di crescita epidermico (EGF), al fattore di crescita trasformante alfa (TGFα) e all'insulina, come dimostrato dall'aumento della proliferazione cellulare in risposta a questi ligandi. È interessante notare che sia le GP2d che le GPSd esprimono un numero comparabile di recettori EGF, ma differiscono nell’espressione dei ligandi dei recettori EGF. Le cellule GP2d presentano abbondante mRNA di anfiregulina, mentre le GPSd esprimono prevalentemente mRNA di TGFα con poca o nessuna anfiregulina, il che è in correlazione con le diverse risposte biologiche osservate.

Queste caratteristiche rendono GP2d un modello prezioso per lo studio della regolazione della segnalazione dei fattori di crescita e dell'adesione cellulare nel cancro del colon-retto. La sua reattività agli stimoli della via dell'EGF e la morfologia epiteliale distinta ne evidenziano l'utilità nello studio della differenziazione e della proliferazione delle cellule tumorali. Inoltre, l'origine condivisa con GPSd consente studi comparativi sulla variazione clonale all'interno dei tumori, in particolare nel contesto delle dinamiche ligando-recettore e delle risposte di transizione epiteliale-mesenchimale (EMT).

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia